产品概述
本试剂盒专为河蟹颤抖病病毒的荧光定量RT-PCR检测设计,采用染料法(如SYBR Green I)进行核酸扩增实时监测。适用于病毒RNA的定性及定量分析,检测灵敏度可达数百拷贝/反应,特异性强,仅针对目标病毒保守序列,与其他病原体无交叉反应。
产品名称
河蟹颤抖病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
英文名称
Chinese Mitten Crab Tremor Disease Virus Dye-based qRT-PCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3500
规格及成分
试剂一:RT-PCR预混液(含逆转录酶、热启动DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料)
试剂二:超纯水(无核酸酶)
试剂三:河蟹颤抖病病毒特异性引物混合液(针对病毒保守序列优化)
试剂四:阳性对照(RNA片段,1×10^8 拷贝/μL)
说明书:操作手册1份
操作流程
样本处理:提取待测样本RNA,避免降解。
阳性对照稀释:按10倍梯度稀释(10^2–10^7 拷贝/μL),用于标准曲线制备。
反应体系配制:
20μL体系:预混液10μL、引物2μL、模板RNA 5μL、超纯水补足至20μL。
荧光定量PCR程序:
逆转录(50℃ 15分钟)→ 预变性(95℃ 5分钟)→ 40循环扩增(95℃ 15秒,60℃ 1分钟,荧光采集)。
注意事项
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月,避免反复冻融。
适用范围:仅限科研使用,不可用于临床诊断。
质量控制:建议每批次实验设置阴性对照(无模板)及阳性对照。
性能参数
灵敏度:≥200拷贝/反应。
特异性:经验证与其他常见水产病原体无交叉反应。
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