禽致病性大肠杆菌O1血清型染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 禽致病性大肠杆菌O1血清型染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Avian Pathogenic Escherichia coli O1 Serotype Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3613 |
试剂盒组成
2×qPCR Magic Mix：500 μL（棕色管，含预混酶、dNTPs及优化缓冲液）。
荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（黄盖，用于模板稀释）。
染料法qPCR引物混合液：100 μL（白盖，针对O1血清型保守基因设计，特异性高）。
阳性对照（需单独存放，避免污染其他组分）。
注：部分版本可能含清理液、染色液等辅助试剂，具体以实际包装为准。
性能特点
高特异性：引物基于O1血清型靶基因序列设计，可有效区分其他血清型或细菌。
高灵敏度：最低检测限达1000拷贝/反应，优于常规PCR。
操作便捷：
即开即用，用户仅需提供DNA模板。
一管式闭管操作，减少交叉污染风险。
一体化反应：RT-PCR步骤在同一管内完成，无需中间转移样品。
实验操作流程
样本准备：提取待测样本DNA，建议浓度≥50 ng/μL。
反应体系配制（20μL体系）：
2×qPCR Magic Mix：10 μL
引物混合液：2 μL
模板DNA：2 μL
稀释液补足至20 μL。
PCR程序设置：
预变性：95℃ 5 min
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（荧光采集）
数据分析：根据标准曲线计算样本拷贝数。
注意事项
避免污染：分区操作（样本处理区、PCR扩增区），使用无菌耗材。
质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板）和阳性对照。
储存要求：试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。
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