产肠毒素性大肠杆菌O139血清型染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 产肠毒素性大肠杆菌O139血清型染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Enterotoxigenic Escherichia coli O139 Serotype Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3610 |
产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术,专用于检测产肠毒素性大肠杆菌O139血清型核酸。适用于科研用途,不可用于临床诊断。
产品特点
即开即用:用户仅需提供待测DNA模板。
高特异性:引物针对O139血清型保守序列设计,无交叉反应。
高灵敏度:检测下限可达数百拷贝/反应。
防污染设计:一管式闭管检测,避免扩增产物污染。
兼容性:适配主流荧光定量PCR仪,需自备10×ROX(依机型需求)。
规格与成分
2×qPCR MagicMix:500 μL(棕色管)
荧光PCR专用模板稀释液:1 mL(黄盖)
O139血清型PCR引物混合物:100 μL(白盖)
PCR阳性对照(1×10⁸ 拷贝/μL):50 μL(红盖)
使用手册:1份
运输与保存
运输条件:低温运输。
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
使用方法
1. 阳性对照稀释(6个梯度制备)
标记离心管(7至2号),每管加45 μL稀释液。
7号管加入5 μL阳性对照(1×10⁸ 拷贝/μL),震荡混匀得1×10⁷ 拷贝/μL梯度,依次稀释至1×10² 拷贝/μL。
2. 样品DNA制备
使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA,建议设置阴/阳性对照。
3. qPCR反应体系(20 μL)
按比例混合2×qPCR MagicMix、引物、模板DNA及ROX(如需)。
程序设置:预变性(95℃, 5 min)→ 40循环扩增(95℃ 15 s, 60℃ 60 s)。
4. 结果分析
基线设定:选择扩增前信号稳定区间(建议循环6-15)。
阈值设定:高于阴性对照扩增曲线的荧光信号。
注意事项
阳性对照稀释需在独立区域操作,避免污染。
实验废弃物需按生物安全规范处理。
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关键字: 产肠毒素性大肠杆菌O139血清型;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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