检测原理:

采用双抗体夹心ELISA法,利用特异性抗体捕捉并结合样本中的PRF1蛋白,再通过酶促反应显色,通过吸光度计算浓度。
检测范围和灵敏度
检测范围:不同试剂盒的检测范围略有差异,通常为0.78-50 ng/mL、0.16-10 ng/mL或7.5-240 pg/mL。
灵敏度:最低检测限可达0.10-0.47 ng/mL或低于1.0 pg/mL。
产品名称 | 小鼠穿孔素1(PRF1)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse PRF1 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A106820 |
产品组成
预包被微孔板、标准品、检测抗体、HRP标记物、显色底物、终止液、缓冲液等。

操作流程

加样:加入样本和标准品。
孵育:与抗体反应。
洗涤:去除未结合物质。
显色:加入底物显色。
终止:加入终止液终止反应。
读数:酶标仪测定吸光度。
适用样本

血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物体液。
保存条件和有效期
保存条件:2-8℃。
有效期:6-12个月
试剂与样本准备阶段:

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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注意事项
科研用途:仅供科研实验使用,不可用于临床诊断。
操作规范:严格按照说明书操作,避免交叉污染,确保实验结果准确。
关键字: 小鼠穿孔素1 ;PRF1;ELISA试剂盒;
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