小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒
产品简介:
小鼠分泌型免疫球蛋白A（sIgA）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中分泌型免疫球蛋白A（sIgA）含量的科研工具。该试剂盒广泛应用于免疫学研究，特别适用于黏膜免疫相关的科研实验，因为sIgA是黏膜免疫系统的主要效应分子，主要存在于乳汁、胃肠液、呼吸道分泌液等外分泌液中。
英文名称 | Mouse sIgA ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A105446 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.15625ng/mL | 检测范围 | 0.3125ng/mL-10ng/mL |
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。具体原理如下：
包被：用抗小鼠sIgA抗体包被微孔板，制成固相抗体。
结合：往包被的微孔中加入标准品或待测样本，样本中的sIgA与固相抗体结合。
检测：加入生物素标记的抗sIgA抗体和HRP标记的亲和素，形成夹心复合物。
显色：加入TMB底物，HRP催化TMB产生蓝色产物，加入终止液后变为黄色。
测定：在450nm波长下测定吸光度（OD值），样本中sIgA浓度与OD值呈正相关。
主要特点
灵敏度：最低检测浓度可达0.094-0.1 ng/mL。
检测范围：通常为0.156-10 ng/mL。
特异性：可特异性检测小鼠sIgA，与类似物无明显交叉反应。
精密度：批内差CV<8%，批间差CV<10%。
样本类型：适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清、尿液等多种液体样本。
操作步骤（简要）
准备：试剂和样本平衡至室温，按需稀释洗涤液。
加样：设标准品孔和样本孔，加入标准品或样本，37℃温育30-60分钟。
洗涤：洗板5次，去除未结合物质。
加检测抗体：加入生物素标记抗体，37℃温育30分钟。
加酶：加入HRP标记亲和素，37℃温育30分钟。
洗涤：再次洗板5次。
显色：加入TMB显色液，37℃避光显色10-15分钟。
终止：加入终止液，反应终止。
测定：在450nm波长下测定OD值，绘制标准曲线，计算样本sIgA浓度。
样本处理
血清：室温凝固或4℃过夜，离心取上清。
血浆：EDTA或肝素抗凝，离心取上清。
组织匀浆：用PBS研磨，离心取上清。
其他：细胞培养上清、尿液等也需离心取上清。
保存：样本可分装冻存于-20℃，避免反复冻融。
注意事项
试剂平衡：使用前需平衡至室温。
洗板：正确洗涤是关键，避免交叉污染。
显色：避光操作，控制显色时间。
标准曲线：每次实验需做标准曲线和复孔。
样本浓度：过高时需稀释样本。
避免污染：所有试剂和样本应避免交叉污染。
如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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注意事项
科研用途：仅供科研实验使用，不可用于临床诊断。
操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。
关键字： 小鼠分泌型免疫球蛋白A ;sIgA;ELISA试剂盒;
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