产品介绍：
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法。预先包被酶标板的特异性抗小鼠IgG2a抗体与样本中的IgG2a结合，洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入显色底物TMB后，酶催化底物显色，颜色深浅与IgG2a浓度成正比。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），并绘制标准曲线，计算样本中IgG2a的浓度。
产品名称 | 小鼠免疫球蛋白G2α(IgG2a)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse IgG2a ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A115958 |
试剂盒组成
酶标包被板：预包被抗小鼠IgG2a抗体的微孔板。
标准品：已知浓度的IgG2a标准品，用于绘制标准曲线。
检测抗体：生物素或辣根过氧化物酶标记的抗小鼠IgG2a抗体。
洗涤液：用于洗涤未结合物质。
显色剂：TMB显色底物，催化后显色。
终止液：终止显色反应，便于测定OD值。
操作步骤
加样：在酶标板孔中加入标准品或样本。
孵育：37℃孵育，使IgG2a与包被抗体结合。
洗涤：去除未结合的物质。
加检测抗体：加入酶标抗体，孵育后洗涤。
显色：加入显色剂，避光孵育，使颜色显色。
终止：加入终止液，终止显色反应。
测定：用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
计算：通过标准曲线计算样本中IgG2a的浓度。
样本处理
血清：全血自然凝固后离心取上清。
血浆：使用EDTA或肝素抗凝，离心取上清。
组织匀浆：组织剪碎后，用PBS匀浆，离心取上清。
细胞培养上清：离心去除细胞碎片，取上清检测。
注意事项
试剂盒保存：2-8℃保存，避免反复冻融。
操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染。
结果判定：以酶标仪读数为准，必要时设置复孔以提高准确性。
试剂与样本准备阶段：
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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关键字： 小鼠免疫球蛋白G2α ;IgG2a;ELISA试剂盒;
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