产品介绍:

产品名称 | 小鼠黄体激素(LH)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse LH ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A106591 |
检测原理
采用双抗体夹心法,用抗小鼠LH抗体包被酶标板,加入标准品或样本后,LH与包被抗体结合。再加入生物素化的抗LH抗体和HRP标记的亲和素,形成免疫复合物。加入TMB底物显色,颜色深浅与LH浓度正相关,通过酶标仪测定OD值,绘制标准曲线计算样本浓度。

产品性能

检测范围:一般为1-50 mIU/ml或0.31-20 ng/mL。
灵敏度:通常为0.5 mIU/ml或0.19 ng/mL。
特异性:仅检测小鼠LH,与其他相关蛋白无交叉反应。
精密度:板内和板间变异系数均小于10%或15%。
试剂盒组成

预包被抗体的酶标板、标准品、生物素标记抗体、HRP标记亲和素、洗涤液、底物液、终止液、封板膜等。
样本处理
血清/血浆:离心后取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
组织裂解液:匀浆后离心取上清。
操作步骤
设置标准品和样本孔,依次加入试剂,温育、洗涤后显色,酶标仪测定OD值,计算浓度。
存储条件
未开封试剂盒避光保存于2-8℃,有效期6个月。
适用样本
血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等。
操作步骤

准备试剂和样本:平衡试剂盒至室温,制备标准品和样本。
加样:在酶标板孔中加入标准品、样本和相关试剂。
温育:37℃温育一定时间,使抗原抗体充分反应。
洗涤:洗去未结合的物质,避免干扰。
加酶标抗体:加入HRP标记的链霉亲和素,再次温育。
再次洗涤:洗去多余的酶标抗体。
试剂与样本准备阶段:

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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关键字: 小鼠黄体激素; LH;ELISA试剂盒;
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