产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发,专用于检测玛尔摩分枝杆菌(Mycobacterium malmoense)的核酸。通过特异性引物和荧光染料对靶基因保守区域进行扩增,结合实时荧光信号监测,实现高灵敏度、高特异性的定性分析。适用于科研用途,不可用于临床诊断。
产品名称 | 玛尔摩分枝杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Mycobacterium malmoense Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3532 |

产品特点

即开即用:预混优化反应体系,用户仅需提供DNA模板。
高灵敏度:引物及探针针对玛尔摩分枝杆菌基因组保守区设计,检测限可达10^2拷贝/μL。
内控设计:含阳性对照,有效区分假阴性结果。
兼容性强:支持多种样本来源(组织、细胞、细菌等),兼容主流核酸提取试剂盒。
组分清单
预混PCR反应液(含荧光染料、dNTPs、聚合酶等)
玛尔摩分枝杆菌特异性引物及探针混合液
阳性对照(1×10^8拷贝/μL)
DEPC-H2O(无核酸酶水)
说明书
实验步骤

样本制备
DNA提取:使用自选方法提取样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
标准曲线制备(需在独立区域操作):
取6管,分别加入45 μL DEPC-H2O,标记为7至2号。
梯度稀释阳性对照:7号管加入5 μL原液(终浓度10^7拷贝/μL),依次稀释至10^2拷贝/μL(6号至2号管)。
PCR反应设置
按以下比例配制反应体系(20 μL/反应):
预混液10 μL
引物探针混合液2 μL
DNA模板2 μL
DEPC-H2O补至20 μL。
上机程序:
预变性:95℃ 3分钟
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40循环,荧光采集)
结果分析
通过荧光阈值(Ct值)判定阳性结果(Ct≤35)。
标准曲线法计算模板拷贝数(需≥3个梯度点,R²>0.99)。
注意事项

实验分区操作(样本制备区、扩增区),避免交叉污染。
阳性对照需单独存放,稀释时使用带滤芯枪头。
样本建议保存于液氮、-80℃或Trizol中,避免反复冻融。
储存与运输
保存条件:-20℃避光,有效期12个月。
运输:干冰或冰袋低温运输。
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关键字: 玛尔摩分枝杆菌;染料法荧光定量;RT-PCR试剂盒;
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