埃可病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 埃可病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Echovirus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3635 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供病毒RNA样本，试剂盒含预混反应液、引物及对照。
高特异性：针对埃可病毒保守序列设计引物，无交叉反应。
高灵敏度：检测下限达数百拷贝/反应。
防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。
兼容性：适用于多数RNA提取方法（需用户自备提取试剂）。
试剂盒成分
| 成分编号 | 名称 | 规格 | 备注 |
| A | 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | 含荧光染料、dNTPs等 |
| B | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于标准曲线制备 |
| - | 阳性对照 | 1×10^8拷贝/μL | 用于质控及定量标准 |
实验流程
RNA提取（样本制备区）：
使用兼容的RNA提取试剂盒获取纯化RNA。
逆转录（RT）（需用户自备逆转录酶）：
将病毒RNA逆转录为cDNA（若试剂盒未包含RT酶）。
标准曲线制备（独立区域操作）：
按10倍梯度稀释阳性对照（1×10^8拷贝/μL起始），制备6个浓度标准品（10^7~10^2拷贝/μL）。
qPCR反应体系配制（反应区）：
每20 μL反应体系：10 μL 2×qPCR MagicMix、0.5 μL引物混合液、2 μL模板（cDNA或标准品）、7.5 μL无核酸酶水。
荧光定量PCR程序：
预变性：95℃ 3分钟；
循环：40×（95℃ 10秒 → 60℃ 30秒，采集荧光信号）。
注意事项
质量控制：每次实验需包含阴性对照（无模板）和阳性对照。
防污染措施：分区操作（样本制备、反应配制、扩增检测），使用带滤芯枪头。
数据解读：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性；定量需基于标准曲线。
适用场景
科研用途：埃可病毒基础研究、流行病学调查等。
不适用场景：临床诊断或治疗决策。
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