检测原理
基于染料法荧光定量PCR技术,通过特异性引物和荧光信号实现对分枝杆菌属DNA的定性与定量检测。
产品名称
人分枝杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Mycobacterium hominis Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3535
产品特点
即开即用:用户仅需提供待测DNA模板,无需额外优化反应体系。
高灵敏度:检测限可达100拷贝/反应,适用于低浓度样本。
特异性强:引物针对分枝杆菌属基因组高度保守区域设计,避免与其他生物DNA交叉反应。
双重检测功能:支持定性与定量分析,定量线性范围覆盖至少5个数量级。
内控设计:含阳性对照,有效排除假阴性结果。
适用范围:仅限科研用途,不可用于临床诊断。
规格与组分
2×SYBR qPCR MagicMix:500 μL(棕色管,预混荧光染料)
荧光PCR专用模板稀释液:1 mL(红盖)
超纯水:1 mL(紫盖)
分枝杆菌属特异性引物混合液:100 μL(白盖)
阳性对照:1管(含标准品DNA)
反应体系:20 μL/次,可完成50次检测。
操作步骤
样本制备(样本制备区)
提取待测样本DNA,建议使用柱式提取试剂盒确保纯度。
阳性对照无需处理,直接使用。
PCR反应体系配制(试剂配制区)
按比例混合各组分(详见说明书附表),加入模板DNA后短暂离心混匀。
荧光定量PCR程序设置
预变性:95℃ 3分钟;
循环阶段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号)。
结果分析
定性:Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性;
定量:通过标准曲线计算模板拷贝数。
注意事项
避免反复冻融试剂,使用前需充分解冻并混匀。
实验分区操作(样本制备、试剂配制、扩增区),防止污染。
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