微黄细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Capillaria philippinensis Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3667
检验原理
采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术,针对Nematodirus helvetianus基因保守区域设计特异性引物,通过体外扩增检测目标核酸。反应体系中若存在微黄细颈线虫核酸模板,PCR扩增过程中释放的荧光信号可被仪器实时监测,实现定性或定量分析。
试剂组成
微黄细颈线虫扩增液(50μL×1管)
荧光PCR专用模板稀释液
阳性对照(1×10^8拷贝/μL DNA片段)
10×ROX参比染料(根据机型适配)
使用方法
1. 阳性对照稀释(以10^2~10^7拷贝/μL梯度为例)
注意事项:操作需在独立区域进行,避免交叉污染。
步骤:
标记6支离心管为7、6、5、4、3、2号。
每管加入45μL荧光PCR专用模板稀释液(使用带滤芯枪头)。
7号管加入5μL阳性对照(1×10^8拷贝/μL),涡旋震荡1分钟,得到1×10^7拷贝/μL标准品,冰上保存。
依次梯度稀释至6号管(1×10^6拷贝/μL)、5号管(1×10^5拷贝/μL),直至2号管(1×10^2拷贝/μL)。每步需更换枪头并充分混匀。
2. PCR反应体系配制
按20μL体系配制:
扩增液10μL
模板DNA 2μL
ROX染料(按仪器要求添加)
补足无核酸酶水至终体积。
注意事项
避免反复冻融试剂,分装保存。
实验废弃物需按生物安全规范处理。
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