巴氏细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 巴氏细颈线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Capillaria belli Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3669 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，试剂盒含预混优化引物及反应体系。
高特异性：基于巴氏细颈线虫保守序列设计引物，避免与其他病原体交叉反应。
高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。
防污染设计：一管式荧光定量PCR，减少操作污染风险。
兼容性：支持多数核酸纯化方法，提供阳性对照（无传染性DNA片段）以区分假阴性。
试剂盒组成
主要成分：
2×qPCR MagicMix（预混PCR试剂，含荧光染料）
荧光PCR专用模板稀释液
巴氏细颈线虫特异性引物混合物
阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）
使用说明书
自备试剂：
DNA模板（用户提供）
10×ROX校正染料（依机型需求选择添加）。
操作步骤
1. 阳性对照稀释（标准曲线制备）
标记6管（7~2号），每管加45μL稀释液。
梯度稀释阳性对照（从10⁸拷贝/μL起始，10倍稀释至10²拷贝/μL），每步换枪头，冰上保存。
2. 样品DNA制备
使用兼容的核酸纯化方法提取待测样本DNA，建议设置N+2个重复（含阳性/阴性对照）。
3. PCR反应体系
按20μL体系配制：10μL预混液、1μL引物、1μL模板DNA、8μL无核酸酶水（需ROX机型按说明添加）。
4. 上机检测
设置扩增程序：预变性（95℃, 3min）→ 40循环（95℃ 15s, 60℃ 30s，荧光采集）。
数据分析
定性检测：直接观察Ct值判断阳性/阴性。
定量检测：以标准曲线（阳性对照log浓度-Ct值）计算样本拷贝数。
注意事项
稀释阳性对照需在独立区域操作，避免污染。
保存及运输需全程-20℃，避免反复冻融。
不同试剂盒组分可能略有差异，请以实际产品说明书为准。
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