产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于检测超广谱β-内酰胺酶（ESBL）大肠埃希菌的DNA，适用于科研实验。试剂盒包含预混优化的引物、反应缓冲液、酶及阳性对照，具有高灵敏度和特异性，可定性或定量分析目标基因，线性范围覆盖5个数量级。
产品名称 | 超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Extended-Spectrum β-Lactamase Escherichia coli Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3567 |
性能参数
灵敏度：100拷贝/反应（线性范围10¹–10⁸拷贝/μL，参考临床样本检测数据）
特异性：与非ESBL大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等无交叉反应（通过溶解曲线Tm值差异验证，目标Tm=83±1℃）
重复性：批内CV<3%，批间CV<5%（n=8次重复实验，针对阳性对照梯度稀释样本）
反应时间：全程约2小时（含样本前处理30分钟+PCR扩增1.5小时）
试剂盒组成
（50次/盒）
2×qPCR Magic Mix 500μL（棕色管） 含热启动DNA聚合酶、dNTP、SYBR Green I染料
ESBL引物混合液 100μL (10μM) 扩增ESBL编码基因保守区（覆盖CTX-M/TEM/SHV型）
阳性对照（质粒DNA） 50μL (1×10⁸ copies/μL) 含blaCTX-M基因片段，用于验证扩增有效性
DNA抽提液（试用装） 9mL 快速裂解细菌释放DNA（含溶菌酶和去污剂）
荧光PCR专用模板稀释液 1mL（黄盖） 阳性对照梯度稀释
操作步骤
试剂准备
解冻与离心：将试剂盒组分（MasterMix、引物、阳性对照等）置于冰上解冻，短暂离心混匀。
标准品稀释（定量检测需制备标准曲线）：
使用专用稀释液将阳性对照（1×10^8拷贝/μL）按10倍梯度稀释至10^2–10^7拷贝/μL，每个梯度需更换枪头避免交叉污染。
反应体系构建
每20μL反应体系建议配比：
MasterMix（含染料、dNTPs、酶）：10μL
引物混合液：2μL
DNA模板：2μL（50ng–1μg）
ddH2O：补足至20μL
PCR程序设置
扩增参数（以常规仪器为例）：
预变性：95℃ 3分钟
循环阶段（35次）：95℃ 30秒 → 58℃ 30秒 → 72℃ 45秒
终延伸：72℃ 5分钟
数据分析
使用荧光定量PCR仪采集Ct值，通过标准曲线计算样本中目标基因的拷贝数。
注意事项
防污染措施：操作分区进行（试剂准备、样本处理、扩增区），使用带滤芯枪头。
质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板对照）和阳性对照。
样本要求：DNA模板需纯化，避免抑制剂干扰。
公司正在出售的产品
嗜水气单胞菌（AH）检测试剂盒（荧光PCR法） | 人醛固酮ELISA试剂盒 |
斑点叉尾鮰病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | X-连锁凋亡蛋白抑制因子检测试剂盒 XIAP ELISA Kit |
班氏丝虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | γ-谷氨酰基转氨酶3检测试剂盒 γGT3 ELISA Kit |
白鲟虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | YY肽2检测试剂盒 PYY2 ELISA Kit |
白蛉热西西里病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | YY1转录因子检测试剂盒 YY1 ELISA Kit |
白乐杰马杜拉放线菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | SynembrynB蛋白检测试剂盒 SYNB ELISA Kit |
白水河病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | Twist邻位子检测试剂盒 TWISTNB ELISA Kit |
小鼠乳腺瘤病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | Tolloid样蛋白1检测试剂盒 TLL1 ELISA Kit |
禽轮状病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒（停） | γ-谷氨酰基转氨酶5检测试剂盒 γGT5 ELISA Kit |
巴西副球孢子菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | γ-谷氨酰基转氨酶6检测试剂盒 γGT6 ELISA Kit |
侵肺巴斯德菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | UDP半乳糖-4-差向异构酶检测试剂盒 GALE ELISA Kit |
超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌染料法荧光定量PCR试剂盒多杀巴斯德菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | β-促脂素检测试剂盒 βLPH ELISA Kit |
巴斯德氏杆菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | YbeY金属肽酶检测试剂盒 YBEY ELISA Kit |
奥尔森派琴虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 丛状蛋白B3检测试剂盒 PLXNB3 ELISA Kit |
海水派琴虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 丛状蛋白B2检测试剂盒 PLXNB2 ELISA Kit |
关键字： 超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的产品品牌。
派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。
派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务！