产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于马媾疫锥虫（Trypanosoma equiperdum）核酸的快速、高灵敏度检测。适用于科研用途（非临床诊断），可实现对目标基因的特异性扩增及定量分析，灵敏度达数百拷贝/反应。
产品名称 | 马媾疫锥虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Trypanosoma equiperdum Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3571 |
产品组成
2×qPCR预混液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺及荧光染料（如SYBR Green）。
PCR引物混合物：针对马媾疫锥虫保守序列设计的特异性引物。
阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL）：已灭活的马媾疫锥虫DNA片段。
模板稀释液：用于标准品梯度稀释及样品制备。
使用手册：含操作流程及数据分析指南。
规格：50次/盒（20 μL反应体系）。
实验步骤
试剂准备
DNA模板提取：使用常规柱式或磁珠法提取待测样本DNA。
阳性对照稀释：按10倍梯度稀释阳性对照至10²–10⁷ 拷贝/μL（需独立操作区，避免污染）。
PCR反应体系配制（冰上操作）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×qPCR预混液 | 10 |
| 引物混合物 | 1 |
| DNA模板/阳性对照 | 2 |
| ddH₂O | 补至20 |
PCR扩增程序
预变性：95℃ 3–5分钟。
循环扩增（35循环）：
变性：95℃ 40秒
退火：58℃ 30秒
延伸：72℃ 60秒
终延伸：72℃ 7分钟。
结果分析
荧光检测：实时监测扩增曲线，阈值循环数（Ct值）用于定量分析。
电泳验证（可选）：取5–10 μL产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳，预期条带大小应与目标基因一致。
注意事项
避免污染：分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），使用带滤芯枪头。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；避免反复冻融。
适用范围：仅限科研，不可用于临床诊断或动物疫病防控。
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关键字： 马媾疫锥虫;染料法荧光定量;RT-PCR试剂盒;
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