小鼠脂氧合酶(LOX)ELISA试剂盒
产品简介:
试剂盒原理
大多数试剂盒采用双抗体夹心法。用纯化的LOX抗体包被微孔板，依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。洗涤后加入底物TMB显色，颜色深浅与LOX含量正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中LOX的浓度。
英文名称 | Mouse LOX ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A116216 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.125ng/mL | 检测范围 | 0.25ng/mL-16ng/mL |
试剂盒组成
酶标包被板：预包被LOX抗体的微孔板。
酶标抗体：HRP标记的LOX检测抗体。
标准品：不同浓度的LOX标准品。
洗涤液：用于洗涤反应孔。
底物液：如TMB显色液。
终止液：如硫酸，用于终止显色反应。
其他：封板膜、说明书等。
样本类型
试剂盒适用于检测血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等样本中的LOX水平。
操作步骤
样本处理：按照说明书要求处理样本，避免使用含的样本，因抑制HRP活性。
标准品稀释：按说明书稀释标准品。
加样：设置空白孔、标准品孔和样本孔，加入相应试剂。
温育：封板后37℃温育一定时间。
洗涤：彻底洗涤反应孔，去除未结合的物质。
显色：加入底物液，避光显色。
终止：加入终止液，终止显色反应。
测定：用酶标仪在450nm波长下测定OD值，计算样本中LOX的浓度。
注意事项
试剂盒保存：2-8℃保存，避免冻结和高温。
样本保存：样本应尽早检测，若需保存，应分装冻存于-20℃，避免反复冻融。
操作规范：严格按照说明书操作，确保实验结果的准确性。
试剂盒性能
灵敏度：最低检测浓度通常小于1.0 pg/mL。
特异性：不与结构类似物交叉反应。
重复性：批内和批间变异系数均小于15%。
线性范围：标准品浓度范围一般为0-400 pg/mL。
稳定性：在2-8℃保存下，有效期通常为6个月。
适用范围
试剂盒仅供科研使用，不得用于临床诊断或人体实验。
如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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注意事项
试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。
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