主要特点:

高灵敏度:最小检测量可达7.9pg/ml,部分试剂盒灵敏度为0.02ng/ml或10pg/ml。
特异性强:与人、大鼠的Lipocalin-2等无交叉反应,确保检测准确性。
重复性好:板内、板间变异系数均小于10%。
适用样本广泛:可用于血清、血浆、细胞培养上清液、尿液等多种样本类型。
产品名称 | 小鼠脂质运载蛋白2(NGAL)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse NGAL ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A115550 |

检测原理:

采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA),通过预包被的单克隆捕获抗体结合样本中的NGAL,再加入生物素化的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素,形成免疫复合物。最后加入显色剂TMB,在酶标仪450nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算NGAL浓度。
典型组成:
酶标包被板
标准品
酶标试剂
洗涤液
显色剂A、B液
终止液
封板膜
说明书
操作步骤:

准备试剂、样品和标准品。
加入样品和标准品,37℃反应30分钟。
洗涤后加入酶标试剂,37℃反应30分钟。
洗涤后加入显色液,37℃显色10分钟。
加入终止液,15分钟内读取OD值。
通过标准曲线计算样品中NGAL的浓度。
保存条件:
标准品:4℃保存1-2周,-20℃保存6个月。
其他组分:4℃保存6个月内有效,严禁冻存。
注意事项:

每次检测需做标准曲线,建议设置复孔。
避免不同批次试剂盒组分混用。
温度控制在25-28℃,确保检测结果准确。
应用领域:
肾脏损伤标志物检测。
炎症、代谢性疾病研究。
肿瘤微环境分析。
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点
ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
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