小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒
产品简介:
英文名称 | Mouse NGAL ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A104735 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 39.0625pg/mL | 检测范围 | 78.125pg/mL-2500pg/mL |
基本原理
双抗体夹心法：多数试剂盒采用此方法，小鼠NGAL捕获抗体预包被于酶标板上，加入样品后，NGAL与抗体结合，再加入生物素标记的检测抗体，形成免疫复合物。随后加入酶标链霉亲和素，显色后通过酶标仪测定吸光度，计算NGAL浓度。
竞争法：部分试剂盒采用此方法，抗体与溶液中的NGAL或固定在板上的NGAL竞争结合，颜色强度与NGAL浓度成反比。
产品组成
预包被酶标板、标准品、生物素标记抗体、酶标二抗、洗涤液、显色液、终止液等。
检测样本
适用样本包括血清、血浆、尿液、细胞培养上清等。
检测范围与灵敏度
检测范围通常为78pg/ml至5000pg/ml或更高，灵敏度可达7.9pg/ml。
操作步骤
样本处理：离心去除杂质，按需稀释。
加样：加入标准品和样本至酶标板。
孵育：各步骤需严格控制时间与温度。
洗涤：去除未结合物质。
显色与比色：加入显色剂，终止反应后测定吸光度。
计算：根据标准曲线计算样本中NGAL浓度。
注意事项
严格按说明书操作，避免交叉污染。
控制实验条件，如温度、试剂用量等。
样本保存应避免反复冻融。
应用领域
用于研究NGAL在炎症、肾脏损伤、肿瘤等疾病中的作用。
如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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注意事项
试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。
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