产品介绍：
产品名称 | 大鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat APLN ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A109588 |
一、试剂盒核心信息
1. 检测目标
Apelin（APLN）：一种由脂肪组织和血管分泌的多肽激素，参与能量代谢、心血管功能调节及炎症反应。
种属特异性：仅针对大鼠APLN，与人、小鼠等物种无交叉反应（需通过品牌说明书确认）。
2. 适用样本类型
液体样本：血清、血浆（推荐EDTA抗凝）、细胞培养上清。
组织样本：脂肪、心脏、肝脏等组织匀浆（需裂解离心后检测）。
3. 检测方法
双抗体夹心ELISA：预包被高亲和力抗大鼠APLN抗体，生物素-链霉亲和素系统放大信号。
二、技术参数与性能
参数 典型值 注意事项
检测范围 15.6–1000 pg/mL 低浓度样本需高灵敏度版本
最低检测限（LOD） 5 pg/mL 避免样本稀释导致误差
板内变异（CV） <8% 复孔设置减少操作误差
板间变异（CV） <12% 建议同一批实验使用同盒试剂
反应时间 3.5小时（含孵育与显色） 显色时间需严格控时
三、核心应用场景
代谢疾病研究
肥胖与糖尿病：APLN通过调节胰岛素敏感性和脂肪分解参与代谢调控。
实验模型：高脂饮食（HFD）诱导的肥胖大鼠模型、Zucker糖尿病肥胖大鼠（ZDF）。
心血管功能研究
血管舒张与血压：APLN通过APJ受体激活NO通路，改善内皮功能。
心肌保护：缺血再灌注损伤模型中APLN的表达变化。
炎症与纤维化
器官纤维化：肺/肝纤维化模型中APLN与炎症因子（TNF-α、IL-6）的关联分析。
四、操作流程关键点
样本前处理
血浆/血清：采集后30分钟内离心（2000×g, 10min, 4℃），-80℃分装保存。
组织匀浆：按1:5（w/v）加入PBS匀浆，离心后取上清（避免反复冻融）。
标准曲线绘制
建议使用试剂盒提供的标准品（浓度梯度：1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6 pg/mL）。
干扰因素控制
溶血/脂血：可能引起假阳性，需超速离心或稀释后检测。
蛋白酶活性：组织样本建议添加蛋白酶抑制剂。
试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：
灵敏度高（抓得准）：
它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。
特异性强（瞄得准）：
基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。
操作简便且快速：
相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广：
它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定：
不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。
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