伊塞克湖病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Issyk-Kul Virus Dye-based qRT-PCR Kit
规格
50T
货号
PR3796
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术开发，专用于伊塞克湖病毒（Issyk-Kul Virus）RNA的定性或定量检测。适用于科研用途，具有高灵敏度和特异性，可兼容常见核酸提取方法。
线性范围：定量检测时覆盖至少5个数量级。
组分清单
荧光定量PCR预混液（含染料、dNTPs、酶等）
伊塞克湖病毒特异性引物对
阳性对照（1×10^8拷贝/μL）
DEPC-H2O（无核酸酶水）
实验步骤
RNA提取（样本制备区）
使用兼容的核酸提取试剂盒或自选方法提取样本RNA，避免RNA降解。
标准曲线制备（样本制备区）
标记6管，编号7至2，每管加45μL DEPC-H2O。
取5μL阳性对照（1×10^8拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到1×10^7拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管（1×10^2拷贝/μL），每步更换枪头。
PCR反应（扩增区）
按20μL体系配制反应液（模板RNA 2μL + 预混液18μL）。
程序设置：
逆转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 5分钟
扩增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）
注意事项
分区操作，避免交叉污染。
阳性对照需独立稀释，防止污染其他组分。
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
质量控制
阴性/阳性对照：需同步检测以排除假阳性或假阴性。
扩增曲线：阳性样本应呈现典型S型曲线，Ct值≤35。
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