产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术,专用于鹅螺旋体病的快速、高灵敏度检测。适用于科研用途(不可用于临床诊断),具有即开即用、特异性强、操作简便等特点。
产品名称 | 鹅螺旋体病染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Goose Spirochetosis Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3685 |

产品特点

即开即用:用户仅需提供DNA模板。
高特异性:引物针对鹅螺旋体病保守序列设计,无交叉反应。
灵敏度高:可检测低至几百拷贝/反应的靶标。
防污染设计:一管式闭管检测,避免扩增产物污染。
配套完整:含阳性对照(1×10⁸拷贝/μL)及标准稀释液,支持定量分析。
规格与成分

| 成分 | 包装规格 | 备注 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL(棕色管) | 含荧光染料、dNTPs、酶等 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) | 用于阳性对照梯度稀释 |
| 鹅螺旋体病PCR引物混合物 | 100 μL(白盖) | 特异性引物及探针 |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL(红盖) | 需独立操作避免污染 |
| 使用手册 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |
样本要求
采集:按常规方法采集样本(如组织、血液等)。
保存与运输:-20℃保存,低温运输(建议泡沫箱加冰密封),有效期1年。
自备试剂:DNA模板、10×ROX(依机型需求)。
操作步骤

1. 阳性对照稀释(示例:10²~10⁷拷贝/μL梯度)
标记6管,分别加入45 μL稀释液。
依次梯度稀释阳性对照(5 μL转移至下一管),震荡混匀后冰上暂存。
2. PCR反应体系(20 μL体系)
按比例混合2×qPCR MagicMix、引物、模板DNA及ROX(若需)。
3. 荧光定量PCR程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 92℃ | 5分钟 |
| 循环反应(30次) | 94℃ | 60秒 |
| | 50℃ | 60秒 |
| | 72℃ | 60秒 |
信号采集:建议在延伸阶段(530 nm波长)。
4. 数据分析
定量检测:以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线,推算待测样本浓度。
注意事项

阳性对照需单独操作,避免污染其他组分。
不同仪器需优化PCR参数(如退火温度)。
试剂盒保存于-20℃,避免反复冻融。
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