产品名称 | 肠道病毒D组染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Enterovirus D Group Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3695 |
适用范围：科研用途，适用于粪便、血液、病灶分泌物等样本中肠道病毒D组核酸的定性检测。
产品特点
即开即用：预混优化试剂，用户仅需提供待测样本RNA。
高特异性：针对肠道病毒D组保守序列设计引物，与其他常见病毒无交叉反应。
高灵敏度：检测限低至100拷贝/反应。
防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。
快速检测：全程约2小时完成反转录及荧光定量PCR。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 | 用途 |
| 2×qPCR预混液（含染料） | 500 μL | PCR扩增主反应液 |
| 肠道病毒D组引物混合物 | 100 μL | 特异性扩增目标序列 |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 标准曲线构建 |
| RNA提取试剂（裂解液） | 9 mL | 样本核酸提取 |
| 荧光PCR专用稀释液 | 1 mL | 阳性对照梯度稀释 |
| 使用说明书 | 1份 | 操作指南 |
样本要求
粪便样本：取0.5 g置于无菌管，立即送检或-80℃保存。
血液样本：EDTA抗凝全血2 mL，4℃保存不超过24小时。
病灶样本：采集新鲜渗出物，避免干燥。
操作步骤
RNA提取：使用配套裂解液按说明书提取样本RNA。
阳性对照稀释：将阳性对照用稀释液梯度稀释为10²~10⁷拷贝/μL（6个浓度点）。
PCR反应体系：
每20 μL反应体系含2×预混液10 μL、引物混合物2 μL、模板RNA 5 μL。
扩增程序：
50℃ 15 min（反转录）→ 95℃ 3 min → 40循环（95℃ 15 s, 60℃ 30 s）。
结果判读
阈值设定：以基线信号均值+10倍标准差为阈值。
阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈S型。
注意事项
实验分区操作，避免交叉污染。
阳性对照需单独存放，严禁与待测样本混用。
本试剂仅限专业人员使用，不适用于临床诊断。
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