产品介绍:

大鼠补体因子4(C4) ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠样本中补体蛋白4(C4)含量的科研工具,广泛应用于免疫学、生物化学和分子生物学等领域的科学研究,不用于临床诊断。
产品名称 | 大鼠补体因子4(C4)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat C4 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A116479 |
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心ELISA法:用抗大鼠C4抗体包被于酶标板上,加入样品(或标准品)和辣根过氧化物酶标记的抗大鼠C4抗体,形成双抗体夹心免疫复合物。游离成分被洗去后,加入显色底物TMB,在辣根过氧化物酶催化下显蓝色,加终止液后变为黄色。在450nm波长处测OD值,C4浓度与OD450值呈正比,通过绘制标准曲线即可计算样品中C4的浓度。

主要组成

通常包含预包被抗体的酶标板、标准品、酶标二抗、显色底物(如TMB)、终止液、洗涤液、样品稀释液等
样本类型
可检测多种样本,包括血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等,部分试剂盒还可检测脑脊液、胸腹水等特殊样本
试剂盒性能

准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值通常大于0.9900
灵敏度:最低检测浓度可达1.88 ng/mL或更低
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应
重复性:板内、板间变异系数一般小于15%
检测范围:不同品牌试剂盒检测范围有所差异,购买时需参考具体说明书
保存与有效期
试剂盒一般2-8℃避光保存,有效期6个月至2年不等,具体取决于不同品牌和批次。
注意事项

仅用于科研,不得用于临床诊断
不同批次试剂不可混用
样品收集、处理和存储需规范操作,避免反复冻融
试剂盒结果可能受操作技术、样本质量等因素影响
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点
ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
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