辛诺柏病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Sin Nombre Virus Dye-based qRT-PCR Kit
规格
50T
货号
PR3817
预期用途
本试剂盒适用于临床或科研样本（如咽拭子、粪便、呕吐物等）中辛诺柏病毒RNA的定性检测。检测结果需结合临床症状及其他实验室指标综合判断。
检测原理
采用染料法荧光定量RT-PCR技术，通过特异性引物扩增病毒保守序列，SYBR Green染料实时结合双链DNA产物并释放荧光信号，通过Ct值定量分析病毒载量。
试剂盒特点
高特异性：针对辛诺柏病毒保守序列设计引物，无交叉反应。
高灵敏度：检测下限可达100拷贝/反应。
便捷性：预混反应液，用户仅需提供模板RNA。
防污染设计：一管式闭盖操作，避免气溶胶污染。
操作步骤
1. 样本处理
提取样本总RNA（建议使用2μg），溶于无RNase水中。
2. RT-PCR反应体系配制（以单次20μL反应为例）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×RT-PCR预混液 | 10 |
| 辛诺柏病毒引物混合液 | 2 |
| 模板RNA | 5 |
| 无核酸酶水 | 补足至20 |
3. 反应程序
逆转录：42℃ 30分钟（若含逆转录步骤）；
预变性：95℃ 3分钟；
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）。
结果判读
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈S型；
阴性：无扩增曲线或Ct值＞38。
注意事项
实验全程需在无RNase环境下操作，避免反复冻融试剂。
建议设置阴性对照（无模板水）和阳性对照（试剂盒提供）。
若样本浓度过高，需稀释后复测以避免抑制效应。
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