短螺旋体通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 短螺旋体通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Brachyspira spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3820 |
产品概述
本试剂盒采用SYBR Green I荧光染料技术，专为短螺旋体核酸（DNA/RNA）的高灵敏度定量检测设计。通过一步法完成反转录（RNA样本）和qPCR扩增，无需分步操作，显著提升检测效率并降低污染风险。适用于临床研究、环境监测及微生物学领域的精准定量分析。
产品组分
2× Advanced SG Buffer：优化的预混缓冲液（含dNTPs、Mg²⁺等）
UH Enzyme Mix：耐热逆转录酶与热启动Taq DNA聚合酶复合物
RNase-free H₂O：无核酸酶水
阳性对照（可选）：非传染性短螺旋体特异性DNA片段
技术参数
灵敏度
RNA样本：高表达靶标检测限达0.1 pg，中等表达靶标为1 pg
DNA样本：单拷贝级别检测
特异性：熔解曲线分析确保扩增产物单一性。
线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。
重复性：低浓度样本复孔CV值<5%。
稳定性：预混液在4℃下可稳定保存24小时。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪（No Rox/Low Rox/High Rox平台）。
操作流程
标准曲线制备（以10²~10⁷拷贝/μL梯度稀释为例）：
使用专用稀释液梯度稀释阳性对照，每步震荡混匀，冰上保存。
反应体系配制（20 μL体系）：
预混液10 μL + 模板2 μL + 引物各0.5 μL + 无核酸酶水补足。
程序设置：
逆转录（RNA样本）：50℃ 15分钟 → 95℃ 5分钟
qPCR扩增：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40循环）
熔解曲线分析：60~95℃（0.5℃/秒）
注意事项
操作需在独立洁净区域进行，避免气溶胶污染。
阳性对照需与待测样本分开放置。
本产品仅限科研使用。
储存条件
-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期
12个月（以包装标注为准）。
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