钩端螺旋体通用染料法荧光定量PCR试剂盒

钩端螺旋体通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

用途说明

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于钩端螺旋体核酸的定性或定量检测，适用于科研用途，不可用于临床诊断。

规格及成分

| 编号 | 成分 | 规格 | 包装标识 |

| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） | 预混反应液 |

| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色盖） | 稀释液 |

| 试剂三 | 引物混合液 | 100 μL（白盖） | 特异性引物 |

| 试剂四 | 阳性对照（1×10^8拷贝/μL）| 50 μL（黄盖） | 标准品 |

| — | 使用手册 | 1份 | 操作指南 |

技术特点

高特异性：针对钩端螺旋体保守序列设计引物，避免交叉反应。

高灵敏度：检测限可达数百拷贝/反应。

便捷性：即开即用，用户仅需提供DNA模板。

防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。

运输与保存

低温运输（-20℃），保存期限12个月。

避光保存反应液，避免反复冻融。

操作步骤

样本准备：

在独立区域处理样本，使用带滤芯枪头避免交叉污染。

阳性对照稀释：

按10倍梯度稀释阳性对照（10^2~10^7拷贝/μL），每步更换枪头并充分混匀。

PCR反应体系配制：

按20 μL体系混合各组分，避光操作。

上机检测：

程序设置：预变性（95℃, 5 min）→ 40循环扩增（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）。

信号采集：复性/延伸阶段检测荧光（激发波长471 nm，发射波长530 nm）。

数据分析

定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。

定性检测：

阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30；

样本Ct≤35为阳性，≥40为阴性；35~40需复测确认。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区分离）。

使用后工作台需用10%次氯酸或75%乙醇消毒。

废弃物按生物危害物处理，遵循《微生物生物医学实验室生物安全通则》。

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