纤维单胞菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专为纤维单胞菌（Cellulomonas spp.）的快速、高灵敏度检测设计。适用于环境样本、临床标本或工业发酵液中纤维单胞菌的定性与定量分析，检测限低至100拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级。

试剂盒组成

2× SYBR qPCR MasterMix（0.5 mL/管）：含优化缓冲液、dNTPs、热启动DNA聚合酶及SYBR Green I荧光染料。

荧光PCR专用模板稀释液（1 mL/管）：用于标准品梯度稀释或样本预处理。

阳性对照（冻干菌株DNA）：验证实验有效性，排除假阴性干扰。

阴性对照（无核酸酶水）：监控交叉污染。

技术参数

检测方法：SYBR Green I染料法，实时监测扩增荧光信号。

灵敏度：100拷贝/反应。

特异性：引物针对纤维单胞菌保守序列设计，经验证无交叉反应。

规格：50次反应（20 μL体系/次）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

操作流程

样本制备：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

反应体系配制：

2× SYBR MasterMix：10 μL

引物混合物（未提供需另购）：各0.4 μM

模板DNA：2 μL

补无核酸酶水至20 μL。

PCR程序：

预变性：95℃ 3分钟；

扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，采集荧光）；

熔解曲线分析：60℃~95℃（0.5℃/秒）。

注意事项

避免反复冻融试剂，溶解后需短暂离心。

熔解曲线需呈现单一峰形，确保扩增特异性。

实验需在符合生物安全标准的实验室进行。

质量控制

阳性对照Ct值≤35，阴性对照无扩增曲线，否则实验无效。

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