产品基本信息

规格:50次反应(50T)
保存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输条件:低温避光运输,支持快递配送。
有效期:12个月(生产日期见包装标签)。
用途:科研用途,用于皱纹毛圆线虫的特异性核酸检测。
产品名称 | 皱纹毛圆线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Trichostrongylus rugatus Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3721 |

试剂盒组成

(以50次反应为例)
PCR预混液(含SYBR Green荧光染料、dNTPs、热启动DNA聚合酶)
皱纹毛圆线虫特异性引物混合液(针对保守基因序列设计)
阳性质控品(含目标基因片段,1×10⁸拷贝/μL)
阴性质控品(超纯水)
使用说明书(含操作流程及数据分析方法)。
操作流程

1. 试剂准备
将预混液分装至PCR管(20μL/管),置于冰上备用。
2. 样本处理
提取待测样本DNA(建议使用核酸提取试剂盒)。
设置对照:
阴性对照:5μL阴性质控品(超纯水)。
阳性对照:5μL稀释后的阳性质控品。
3. 加样
每管加入5μL模板DNA(或对照品),总反应体积25μL。
加样顺序:阴性对照→待测样本→阳性对照,避免交叉污染。
4. PCR扩增
推荐循环参数(以ABI 7500为例):
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性-退火-延伸 | 95℃ | 10 sec | 35 |
| | 58℃ | 15 sec | |
| | 72℃ | 20 sec | |
| 最终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
5. 结果分析
荧光定量法:实时监测SYBR Green信号,阈值线需高于阴性对照背景。
判定标准:
阳性:Ct值≤45,扩增曲线呈S型。
阴性:无Ct值或Ct值>45。
注意事项

实验需在生物安全柜中进行,避免气溶胶污染。
试剂解冻后需充分混匀,避免反复冻融(建议分装保存)。
不同PCR仪器需优化循环参数,具体参考仪器说明书。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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关键字: 皱纹毛圆线虫;染料法荧光定量;PCR试剂盒;