产品基本信息
规格：50次反应（20μL/反应）
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；低温运输（干冰或冰袋）。
适用样本：病毒RNA（需配合逆转录步骤）或DNA提取物。
应用范围：科研用途，不可用于临床诊断。
产品名称 | 伪牛痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Pseudocowpox Virus Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3729 |
产品特点
高灵敏度：优化引物设计，检测限低至10拷贝/μL。
特异性强：针对伪牛痘病毒保守序列设计，避免与其他病原体交叉反应。
操作简便：预混反应体系（含染料、酶、缓冲液），只需加入模板即可运行。
兼容性广：适配常见荧光定量PCR仪（如ABI、Bio-Rad、Roche等）。
质量控制：提供阳性对照（无传染性DNA标准品），便于结果判读。
试剂盒组分
| 成分 | 规格（50次） | 保存条件 |
| qPCR预混液（含染料） | 1 mL | -20℃ |
| DNA聚合酶混合液 | 100 μL | -20℃ |
| 伪牛痘病毒引物混合液 | 100 μL | -20℃ |
| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL | -20℃ |
| 无核酸酶水 | 1 mL | 室温 |
实验流程
1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒获取病毒RNA/DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
2. 标准曲线制备（定量检测需选做）
将阳性对照按10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），每个梯度重复3孔。
3. PCR反应体系配制（20μL/反应）
| 组分 | 体积 |
| qPCR预混液 | 10 μL |
| 引物混合液 | 2 μL |
| 模板DNA/RNA | 2 μL |
| 无核酸酶水 | 6 μL |
4. 扩增程序
| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃/3 min | 1 |
| 变性 | 95℃/15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃/30 sec | 40 |
| 荧光采集 | 60℃ | 每循环 |
结果分析
阈值设定：以3–15循环的荧光信号基线标准差10倍为阈值。
Ct值判读：Ct≤35且扩增曲线呈S型判为阳性；Ct>35或无扩增曲线为阴性。
注意事项
实验分区操作（样本制备区、PCR反应区），避免污染。
阳性对照需单独稀释，防止污染待测样本。
染料法可能产生非特异性信号，建议通过熔解曲线验证产物特异性。
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关键字： 伪牛痘病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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