水牛正痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

水牛正痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR（qPCR）技术，专用于水牛正痘病毒（Buffalo Pox Virus, BPXV）核酸的高灵敏度检测。通过特异性引物结合荧光染料（如SYBR Green I），实时监测扩增过程中的荧光信号，实现病毒核酸的定性与定量分析。

适用范围

检测对象：水牛、牛等动物样本（全血、血清、组织、拭子等）。

用途：科研实验，不适用于临床诊断。

样本处理

采集：按常规方法采集样本，避免交叉污染。

保存与运输：

短期保存：-20℃（有效期1年）；长期建议-80℃。

运输需使用泡沫箱加冰密封，确保低温环境。

自备试剂：样本DNA提取试剂。

试剂盒组成

PCR反应液：含缓冲液、dNTPs、Mg²⁺等。

荧光染料：最大吸收光谱471 nm（游离状态），结合DNA后为500 nm（发射光谱530 nm）。

阳性对照：梯度稀释的病毒DNA片段（10²~10⁷拷贝/μL），需独立操作以防污染。

阴性对照：无核酸酶水。

操作步骤

阳性对照稀释：

按10倍梯度稀释（如10⁷~10²拷贝/μL），每步更换枪头，冰上操作。

PCR反应体系：

加入模板DNA、反应液及染料，混匀后离心。

扩增程序：

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 预变性 | 92℃ | 5分钟 |

| 循环（30次）| 94℃ | 60秒 |

| | 50℃ | 60秒 |

| | 72℃ | 60秒 |

信号采集：复性或延伸阶段（530 nm通道）。

数据分析

定性检测：Ct值≤35判定为阳性。

定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，推算待测样本浓度。

注意事项

分区操作：样本处理、PCR配制及扩增需在独立区域进行。

避免污染：阳性对照单独存放，使用带滤芯枪头。

仪器优化：扩增参数可根据设备型号调整。

储存与有效期

未开封试剂：-20℃避光保存，有效期12个月。

开封后：分装冻存，避免反复冻融。

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