产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专为链霉菌（Streptomyces spp.）的快速、高特异性检测设计，适用于科研用途。试剂盒包含优化的预混反应体系，可实现DNA模板的定性或定量分析，并配备阳性和阴性质控品以确保实验可靠性。
产品名称 | 链霉菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Streptomyces spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3731 |
产品组成
链霉菌扩增预混液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料（如SYBR Green）。
链霉菌特异性引物：针对链霉菌保守基因区域设计。
阳性质控品：含链霉菌靶序列的重组质粒或基因组DNA。
阴性质控品：无DNA模板的灭菌超纯水。
使用说明书（当前文档）。
操作步骤
1. 样本处理
DNA提取：使用商业DNA提取试剂盒或酚-氯仿法从土壤、发酵液等样本中提取基因组DNA。
浓度测定：建议DNA纯度（A260/A280）为1.8~2.0，浓度≥10 ng/μL。
2. 试剂配制（在无菌环境下操作）
将预混液、引物及模板DNA解冻后涡旋混匀，短暂离心。
按20 μL体系配制反应液（示例）：
预混液：10 μL
正向/反向引物：各0.5 μL
模板DNA：2 μL
超纯水：补至20 μL
3. PCR扩增
按以下程序设置扩增条件（需根据仪器型号调整）：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 30秒 → 60℃ 30秒（荧光采集） → 72℃ 30秒
熔解曲线分析：65℃~95℃，每0.5℃递增5秒
4. 结果分析
定性检测：通过熔解曲线峰形及Ct值判断样本阳性（Ct≤35）或阴性（无扩增曲线）。
定量检测：以阳性质控品梯度稀释的标准曲线计算样本初始DNA浓度。
注意事项
防污染措施：分设样本处理区、试剂配制区和扩增区，使用一次性耗材及紫外线消毒台面。
试剂保存：未开封试剂盒-20℃避光保存，避免反复冻融；解冻后预混液需避光。
质控要求：每批次实验需包含阴性质控（排除污染）和阳性质控（验证反应效率）。
适用范围：本试剂盒仅限科研使用，不适用于临床诊断。
技术参数
检测限：≤10 copies/μL（依赖样本类型）。
特异性：不与常见非链霉菌微生物DNA交叉反应。
规格：50次/盒（20 μL反应体系）。
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关键字： 链霉菌通用;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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