产品概述
本试剂盒采用荧光定量RT-PCR技术，专为检测布尼亚维拉病毒（Bunyamwera Virus）RNA设计，适用于科研实验。通过特异性引物和探针实现对病毒核酸的高灵敏度扩增与定量分析，检测限可达数百拷贝/反应。
产品名称 | 布尼亚维拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Bunyavella Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3741 |
检验原理
基于一步法荧光RT-PCR技术，试剂盒针对布尼亚维拉病毒保守序列设计引物和荧光标记探针。在逆转录酶和DNA聚合酶作用下，病毒RNA经逆转录为cDNA后扩增，通过实时监测荧光信号实现定量检测。
试剂组成
反应液：含缓冲液、dNTPs、Mg²⁺等，预混为即用型Mastermix。
酶混合液：含逆转录酶、热启动Taq DNA聚合酶。
阳性质控品：梯度稀释的DNA片段（10^2–10^7拷贝/μL），需独立操作避免污染。
阴性质控品：无核酸酶水，用于排除交叉污染。
ROX参比染料（适配部分机型）。
规格：50次/盒（20μL反应体系）。
储存与有效期
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤5次）。
有效期：12个月。
运输：低温冰袋（2–8℃）。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 7500/QuantStudio系列
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler
安捷伦MX3000P/3005P
样本要求
类型：病毒RNA（需通过商业试剂盒提取）。
浓度：建议10–100 ng/μL，A260/A280比值1.8–2.0。
保存：短期-20℃，长期-70℃（≤6个月）；运输需冰袋（2–8℃）。
操作步骤
试剂准备：
解冻后短暂离心混匀，避免反复冻融。
按比例配制反应体系（模板RNA≤5μL/反应）。
程序设置：
逆转录：50℃ 15分钟。
预变性：95℃ 2分钟。
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环）。
数据分析：
阈值循环数（Ct值）≤35判为阳性，阴性对照应无扩增。
注意事项
仅限科研：不可用于临床诊断。
分区操作：核酸提取、试剂配制、扩增需独立区域。
质控要求：每批次实验需包含阴阳性对照。
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