产品特点
即开即用：用户仅需提供DNA模板，预混试剂包含PCR所需全部组分（染料、引物、酶等）。
高特异性：引物基于伯氏立克次氏体保守区设计，无交叉反应。
灵敏度与定量能力：检测线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL），支持定性和定量分析。
内置对照：提供阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），用于排除假阴性。
操作便捷：PCR产物可直接上样电泳，含上样染料。
产品名称 | 伯氏立克次氏体(柯克斯体)染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Rickettsia burnetii (Coxiella) Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3743 |
试剂盒组分
| 成分 | 规格/包装 | 保存条件 |
| PCR预混液（含染料） | 1 mL | -20℃避光 |
| 引物混合液 | 100 μL | -20℃避光 |
| 阳性对照DNA | 50 μL（10⁸拷贝/μL） | 单独存放，避免污染 |
| 核酸释放剂（试用装） | 1 mL | -20℃ |
| 超纯水 | 1 mL | 室温 |
| 使用手册 | 1份 | 随盒保存 |
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（有效期12个月）。
运输方式：低温避光运输，阳性对照需单独密封。
实验步骤
1. 样品DNA制备
使用核酸释放剂提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
2. 阳性对照稀释（梯度制备）
按10倍梯度稀释阳性对照（10²~10⁷拷贝/μL），每步更换枪头，避免污染。
3. PCR反应体系（20μL）
模板DNA：2 μL
PCR预混液：10 μL
引物混合液：1 μL
超纯水：补至20 μL
4. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |
| 荧光采集 | 60℃ | 30 sec | |
5. 结果分析
定量：通过标准曲线计算拷贝数。
定性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。
注意事项
实验分区操作，避免交叉污染。
阳性对照需最后加入，并单独存放。
试剂解冻后需彻底混匀，短暂离心后使用。
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关键字： 伯氏立克次氏体(柯克斯体);染料法荧光定量;PCR试剂盒;