雅氏瓦螨染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 雅氏瓦螨染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Varroa jacobsoni Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3858 |
产品概述
本试剂盒基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术，专用于雅氏瓦螨（Varroa jacobsoni）的快速、高灵敏度检测。通过针对雅氏瓦螨保守基因序列（如线粒体16S rRNA或COI基因）设计的特异性引物，实现精准扩增，适用于科研领域对蜜蜂寄生螨的分子生物学研究。
产品特点
即开即用：预混反应体系含所有必要组分（酶、dNTPs、缓冲液等），用户仅需提供DNA模板。
高特异性：引物经严格验证，与狄斯瓦螨等近缘物种无交叉反应。
高灵敏度：检测下限可达几百拷贝/反应（或1.0×10³拷贝/mL）。
防污染设计：一管式闭管操作，减少气溶胶污染风险。
兼容性广：适配主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。
规格与组分
| 成分编号 | 组分名称 | 规格 | 包装颜色 |
| 2×qPCR MagicMix（预混液） | 500 μL/管 | 棕色管 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |
| 雅氏瓦螨PCR引物混合物 | 100 μL | 白盖 |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 红盖 |
| — | 使用手册 | 1份 | — |
操作流程
1. 样本制备
样本类型：蜜蜂体表洗脱液、组织匀浆液或蜂巢碎片。
DNA提取：推荐使用商品化核酸提取试剂盒，或按说明书进行热裂解释放DNA。
2. 反应体系配置（20 μL体系）
| 组分 | 体积 |
| 2×qPCR MagicMix | 10 μL |
| 引物混合物 | 0.5 μL |
| DNA模板 | 5 μL |
| 无菌水（补足体积） | 4.5 μL |
注意：预混液需涡旋混匀后瞬时离心，加样建议在冰上操作。
3. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| | 60℃ | 1 min | |
| 荧光信号采集 | 60℃ | 10 sec | |
仪器设置：选择SYBR Green通道，无需ROX校正。
4. 结果分析
阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型。
阴性对照：应无扩增信号（Ct值≥40或无信号）。
注意事项
适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（预混液分装后使用）。
质量控制：每次实验需包含阳性对照和阴性对照。
污染防控：实验区域分区操作，使用无核酸酶耗材。
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