技术原理
染料法荧光定量PCR基于双链DNA结合染料的荧光信号累积原理。在PCR扩增过程中,SYBR Green等染料与双链DNA结合后发出荧光,荧光强度与扩增产物的量成正比。通过实时监测荧光信号变化,可实现对武氏盾螨DNA的定量检测。
产品名称
武氏盾螨染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Scutomegninia wui Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4103
技术特点
高灵敏度:可检测低至10 ng的DNA模板。
高特异性:通过熔解曲线分析排除非特异性扩增。
快速高效:全程检测时间约3小时。
操作简便:预混试剂体系,减少操作步骤。
防污染设计:含dUTP/UDG酶系统,有效防止扩增产物污染。
操作步骤
样本处理:提取待测样本DNA,建议使用配套核酸提取试剂。
反应体系配制(以50 μL为例):
预混PCR Master Mix:25 μL
引物探针混合液:5 μL
模板DNA:5 μL
无核酸酶水:补至50 μL
PCR程序设置:
预变性:95℃ 5分钟
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(采集荧光)
熔解曲线分析(可选):60℃~95℃,每0.5℃递增。
数据分析:使用配套软件根据标准曲线计算样本浓度。
注意事项
避免反复冻融试剂,分装后使用。
实验环境需严格分区(试剂准备区、样本处理区、扩增区)。
阴性/阳性对照需同步检测。
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