产品特点

高特异性:针对鲍疱疹样病毒保守序列设计引物,无交叉反应。
高灵敏度:检测限低至数百拷贝/反应。
便捷性:即开即用,用户仅需提供DNA模板。
防污染设计:一管式闭管检测,避免扩增产物污染。
兼容性:支持常见荧光定量PCR仪(需根据机型添加10×ROX参比染料)。
产品名称 | 鲍球状病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Abalone Spherical Virus Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3760 |

试剂盒组成

PCR反应液:预混含染料、dNTPs、Mg²⁺、缓冲液等。
阳性对照:1×10⁸拷贝/μL的AbHV DNA片段(非活病毒)。
荧光PCR专用模板稀释液:用于标准曲线制备。
说明书(以实际包装内为准)。
操作步骤

样本DNA提取
建议使用兼容的核酸提取试剂盒,提取后DNA应避免反复冻融。
标准曲线制备(独立区域操作)
标记6管(7-2号),每管加45 μL稀释液。
梯度稀释阳性对照:
7号管:5 μL原液(10⁸拷贝/μL)→ 震荡混匀→ 10⁷拷贝/μL。
依次稀释至2号管(10³拷贝/μL),每次更换枪头。
PCR反应体系配制
每20 μL反应体系建议:
10 μL预混PCR反应液
2 μL DNA模板(样本/标准品)
0.5 μL引物探针混合液(若未预混)
补足无核酸酶水至20 μL。
扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | 40 |
(注:具体参数需根据引物特性优化)
注意事项

分区操作:样本制备、试剂配制、扩增需在独立区域进行,避免污染。
阳性对照:严禁直接使用高浓度原液,需严格按梯度稀释。
质量控制:建议每批次实验包含阴性对照(无模板水对照)。
仪器校准:使用前确认荧光通道与染料匹配(如FAM/SYBR Green)。
结果判读
阈值设定:以扩增曲线指数期起始点为基准。
定量分析:根据标准曲线(Ct值-log拷贝数)计算样本病毒载量。
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关键字: 鲍球状病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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