牡蛎包拉米虫染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒专为检测牡蛎包拉米虫（Bonamia ostreae）设计，采用染料法荧光定量PCR技术，具有高灵敏度和特异性，适用于科研领域（不可用于临床诊断）。试剂盒包含预混反应体系、专用引物及阳性对照，支持50次20μL反应体系，操作简便且可避免交叉污染。

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板或病毒样品即可进行检测。

高特异性：引物针对牡蛎包拉米虫保守序列设计，无交叉反应。

高灵敏度：检测限低至几百拷贝/反应。

闭管操作：一管式反应设计，减少污染风险。

稳定可靠：预混试剂经优化，适用于标准荧光定量PCR仪。

规格与成分

| 成分名称 | 规格/包装 | 保存条件 |

| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | -20℃ |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | -20℃ |

| 牡蛎包拉米虫PCR引物混合物 | 100 μL（白盖） | -20℃ |

| 阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL） | 50 μL（红/黄盖） | -20℃ |

操作步骤

样本准备：提取待测样本DNA，稀释至适当浓度。

反应体系配制（20μL/反应）：

2×qPCR MagicMix：10 μL

引物混合物：0.5 μL

模板DNA：2 μL

稀释液补足至20 μL

PCR程序设置：

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |

| 变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |

| 退火 | 50-65℃ | 20 sec | |

| 延伸 | 72℃ | 30 sec | |

| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |

注：退火温度需根据引物Tm值调整（建议低于理论值2-5℃）。

注意事项

储存与运输：试剂盒需-20℃保存，避免反复冻融；运输采用低温条件。

有效期：自生产日期起1年（详见包装标签）。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。

质控建议：

阳性对照需扩增出预期条带，否则需检查试剂活性或反应条件。

样本无信号时，建议优化模板浓度或重新提取DNA。

常见问题与解决

无扩增信号：

可能原因：反应条件未优化、试剂失活。

解决：调整退火温度，更换新鲜试剂。

弱扩增条带：

可能原因：模板降解或浓度过低。

解决：重新制备模板，增加模板量。

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