产品名称 | 杀蛎包拉米虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Bonamia exitiosus Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3764 |
适用物种：牡蛎包拉米虫（Bonamia spp.）
用途：科研检测，不可用于临床诊断。
性能特点
即开即用：用户仅需提供DNA模板，无需额外配制反应体系。
高特异性：引物针对包拉米虫保守区域设计，避免交叉反应。
高灵敏度：荧光定量PCR技术检测限低，优于常规PCR。
闭管操作：一管式设计减少气溶胶污染风险。
内控对照：含阳性对照（1×10^8拷贝/μL），便于结果判读。
包装组分
主反应液：2×qPCR Magic Mix（500 μL，棕色管）。
稀释液：荧光PCR专用模板稀释液（1 mL，黄盖）。
引物混合液：染料法qPCR引物（100 μL，白盖）。
阳性对照：1×10^8拷贝/μL（50 μL，黄盖）。
规格：50次/盒（20 μL反应体系）。
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输方式：低温干冰运输。
有效期：12个月（生产日期见标签）。
实验步骤
模板制备：提取样本DNA，用稀释液调整至合适浓度。
反应体系配制（20 μL/反应）：
2×qPCR Magic Mix：10 μL
引物混合液：2 μL
DNA模板：2 μL
ddH₂O：补至20 μL
PCR程序设置：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
| 退火 | 50-65℃ | 20 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 30 sec/kb| |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
注：退火温度需根据引物Tm值调整，延伸时间按片段长度计算（1 kb以内建议30 sec）。
常见问题与解决
无扩增信号：检查试剂活性、反应条件或重新设计引物。
假阴性结果：避免模板降解或抑制剂干扰，建议使用新鲜试剂。
非特异性条带：优化退火温度或减少模板量。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，防止污染。
阳性对照与待测样本需分区域操作。
废弃物料需按生物安全规范处理。
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