重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
重组人DUSP18蛋白(Recombinant Human Dual Specificity Phosphatase 18)是一种通过基因工程技术在体外表达和纯化的关键信号转导调节酶。作为丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的负调控因子,DUSP18在细胞增殖、凋亡及肿瘤发生发展中扮演着重要的“分子刹车”角色。该重组蛋白不仅是研究细胞信号转导机制的有力工具,也是肿瘤免疫和药物开发领域的新兴靶点。
产品名称; Recombinant Human DUSP18
别名; Dual specificity protein phosphatase 18, DUS18_HUMAN, Dusp18, LMW-DSP20, LMWDSP20, Low molecular weight dual specificity phosphatase 20
宿主; E.Coli
表达区间; 1-188
分子量; 20.6 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
天门冬氨酸甲基转移酶PCMT | 体液内毒素比色法定量酶联免疫试剂盒 |
跨膜和卷曲螺旋结构域蛋白1 | 间接酶联免疫试剂盒(含AP二抗) |
一步法荧光定量PCR反应液 | TNF BETA蛋白表达ELISA定量酶联免疫试剂盒 |
组织ROCK激酶总活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 血液一氧化氮(NO)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
纯化大鼠肾上腺髓质素(AM)基因重组表达载体(pcDNA-AM) | ZRSR2蛋白抗体 |
钙激活钾通道蛋白β2 | G蛋白偶联受体ARHGEF18抗体 |
细胞AKT蛋白表达流式细胞仪pcr检测试剂盒 | 细胞LYNA激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
组织生物化学成分定量检测试剂专题 | 100,165,001,650,023 |
肿瘤坏死因子受体超家族成员13B | DNAJC11蛋白抗体 |
环指蛋白142 | 磷酸化整合素β2(CD18)抗体 |
PE-Cy5.5标记小鼠CD4单克隆 | 单羧酸转运蛋4抗体 |
肠致病性大肠杆菌(Enteropathogenic E. coli)鉴定 | Recombinant Human DUSP18烟碱型乙酰胆碱受体ε抗体 |
神经纤毛蛋白1重组兔单克隆抗体 | 5-羟色胺受体2B抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: DUSP18;20.6 kDa; 1-188;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。