操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human EIF2AK1(真核翻译起始因子2-α激酶1),也称为HRI(血红素调节抑制因子),是一种通过基因重组技术在体外表达和纯化的关键应激感应蛋白激酶。该蛋白作为细胞内血红素水平的“传感器”,在调控蛋白质合成、应对环境应激及红细胞生成中扮演着核心角色。
产品名称; Recombinant Human EIF2AK1
别名; HCR; HRI; KIAA1369
宿主; E.Coli
表达区间; 1-194
分子量; 42.4 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

同源三聚体锌指蛋白ZHX3 | 细胞花生四烯酸(arachidonic acid)高效液相色谱法定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化MDM2样P53结合蛋白 | 组织高密度脂蛋白(HDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量酶联免疫试剂盒 |
免疫组化AP-BCIP/NBT底物显色试剂盒 | CDK4蛋白表达ELISA定量酶联免疫试剂盒 |
动物组织总ATP酶(total ATPase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 石蜡切片磷脂尼罗红(Nile Red)直接荧光染色试剂盒 |
动物细胞N-乙酰转移酶1(NAT1)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗体 |
高分子量激肽原轻链 | JDP2蛋白抗体 |
冰冻切片组织GSK-3BETA蛋白表达荧光显微镜pcr检测试剂盒 | 组织SRCN2激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
组织半胱(cysteine)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 真菌/酵母细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 |
转录因子HELT蛋白 | FAM149B1蛋白抗体 |
甲状腺受体相互作用蛋白6 | 莫洛尼白血病病毒10样蛋白1抗体 |
PSPC1蛋白 | 电压门控性钾通道蛋白亚基kv6.1抗体 |
组织HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性pcr检测试剂盒 | Recombinant Human EIF2AK1异质核核糖核蛋白R抗体 |
AF680标记的整合素αVβ5抗体 | APC标记小鼠CD107a单克隆抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: EIF2AK1;42.4 KDa; 1-194;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。