重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human eIF3K(重组人真核翻译起始因子3亚基K)是一种通过基因重组技术在体外表达和纯化的关键翻译调控蛋白。它对应于人体内的 EIF3K 基因(Eukaryotic Translation Initiation Factor 3 Subunit K),属于真核翻译起始因子3(eIF3)复合物的最小亚基。
产品名称; Recombinant Human eIF3K
别名; ARG134, eIF 3 p25, eIF 3 p28, eIF-3 p25, eIF-3 p28, EIF3-p28, eif3k, EIF3K_HUMAN, EIF3S12, Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit 12, Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit K, HSPC029, M9, MSTP001, Muscle specific gene M9 protein, Muscle-specific gene M9 protein, PLAC 24, PLAC-24, PLAC24, PRO1474, PTD001
宿主; E.Coli
表达区间; 1-218
分子量; 23.9 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
突触后密度蛋白93 | 细胞乙酰酯酶活性荧光法定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化癌基因ETS2 | 血液S-腺苷甲硫(SAM或AdoMet)酶连续循环比色法定量酶联免疫试剂盒 |
随机引物DNA探针同位素标记产物完全双链制备试剂盒 | 体外微管蛋白(tubulin)结合分子(binding molecules)酶联免疫试剂盒 |
细菌半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量pcr检测试剂盒 | 血液过氧化氢酶(CATALASE)过氧化活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
细胞色素P450亚酶CYP2E1(MFC)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | β淀粉样肽(1-42)单克隆抗体 |
睾丸特异性锚样蛋白1 | INTS5蛋白抗体 |
石蜡切片组织GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜pcr检测试剂盒 | 细胞Src激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
组织O链接硫酸酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量pcr检测试剂盒 | 完全线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒 |
转录因子KLF9 | DNA结合抑制因子2抗体 |
甲胎蛋白调节蛋白1 | 磷酸肌醇3激酶接头蛋白1抗体 |
PE标记人CD9单克隆 | 促微管蛋白聚合蛋白家族成员2抗体 |
组织HHV6-B(HUMAN HERPESVIRUS 6-B)病毒定性pcr检测试剂盒 | Recombinant Human eIF3K原钙粘蛋白γB6抗体 |
AF750标记的环指蛋白15抗体 | APC-Cy7标记小鼠CD45.1单克隆抗体 |
关键字: eIF3K;23.9 kDa; 1-218;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。