重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human EMG1(重组人核仁蛋白EMG1)是一种通过基因重组技术在体外表达和纯化的关键核糖体生物合成因子。该蛋白在核糖体小亚基的组装和rRNA修饰中发挥核心作用,其功能异常与一种严重的遗传性疾病——鲍文-康拉迪综合征(Bowen-Conradi Syndrome)密切相关。
产品名称; Recombinant Human EMG1
别名; 18S rRNA (pseudouridine(1248)-N1)-methyltransferase, 18S rRNA Psi1248 methyltransferase, C2F, C2f protein, EMG 1, EMG1, EMG1 N1 specific pseudouridine methyltransferase, EMG1 nucleolar protein homolog, EMG1 nucleolar protein homolog (S cerevisiae), essential for mitotic growth 1, FLJ60792, Grcc2f, NEP1, NEP1_HUMAN, Nucleolar protein EMG1 homolog, Protein C2f
宿主; E.Coli
表达区间; 2-244
分子量; 47.2 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
突触富含脯氨酸膜蛋白7 | 细胞苏木素伊红染色试剂盒 |
FITC标记小鼠CD38单克隆 | 冰冻切片组织AKT蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
果菜D-葡萄糖激酶法定量pcr检测试剂盒 | IP3R受体蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
细胞人体腺病毒(adenovirus)定性pcr检测试剂盒 | 咖啡糖精(saccharin)含量薄层色谱法定性酶联免疫试剂盒 |
组织IKKβ激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 囊泡转运蛋白SFT2B抗体 |
含亮氨酸神经胶质瘤失活蛋白4 | 蛋白质二硫键异构酶抗体 |
细胞/组织高尔基体粗提分离试剂盒 | 细胞/组织白蛋白载玻片制备试剂盒 |
组蛋白H3-S31磷酸化pcr检测试剂盒 | 动物细胞钠/钾ATP酶(Na+/K+ -ATPase)活性比色法 |
自水解酶结构域5蛋白 | 异质性核糖核蛋白M抗体 |
甲状腺激素反应蛋白 | APC-Cy7标记人/小鼠CD11b单克隆抗体 |
RNA结合蛋白23 | 连接粘附分子2抗体 |
AF680标记的乳铁蛋白 | Recombinant Human EMG1α-1抗胰糜蛋白酶/SERPINA3抗体 |
细菌异化型硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒 | JNK/ SAPK抑制激酶抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: EMG1;47.2 kDa; 2-244;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。