人直肠平滑肌细胞

细胞简介：

人直肠平滑肌细胞分离自直肠组织；直肠为大肠的未段，位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿过盆膈，下端以肛门而终。直肠上端的大小似结肠，其下端扩大成直肠壶腹，是粪便排出前的暂存部位，最下端变细接肛管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切，与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带，位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态：大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉，来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式；肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生，这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养，可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。

产品信息：

方法简介：实验室分离的人直肠平滑肌细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人直肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：人直肠平滑肌细胞

组织来源：直肠组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶人直肠平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞接种：

细胞计数与密度调整

使用血球计数板或细胞计数仪准确计数，调整细胞密度至合适范围（不同细胞类型差异较大，一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml）

密度过低：细胞无法分泌足够的生长因子，难以存活；密度过高：细胞竞争营养物质，易出现接触抑制

培养基选择

优先使用原代细胞专用培养基，若使用通用培养基，需添加合适的生长因子、血清等补充成分（如成纤维细胞添加FGF，内皮细胞添加VEGF）

血清浓度：原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%，部分特殊细胞（如神经细胞）需使用无血清培养基

培养环境控制

温度：哺乳动物细胞一般为37℃，鸟类细胞38.5℃，昆虫细胞27℃

CO₂浓度：大多数细胞需要5%CO₂，维持培养基pH在7.2-7.4之间

湿度：培养箱湿度保持在70%-80%，避免培养基蒸发过快
原代细胞实验注意事项：

取材要快、要新鲜、全程无菌

组织离体时间越短越好，冰上操作，减少缺血损伤。

严格控制细胞代数

原代细胞只建议用 P0～P3，代数越高越容易分化、结果越不可靠。

接种密度宁高不低

原代细胞普遍怕稀，太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。

消化是关键，宁轻勿重

胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止，过度消化必死一批。

吹打轻柔，避免机械损伤。

培养基和血清不要随便换批次

血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次，换批次必须先预实验。

避免频繁折腾细胞

少开培养箱门，不反复观察、不反复拿进拿出，温度、pH 波动对原代杀伤极大。

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