人主动脉内皮细胞 新品

细胞简介：

人主动脉内皮细胞分离自主动脉组织；主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为：升主动脉起于左心室，至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓，弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉；在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉，以上为胸主动脉，至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉；髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞，可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态，当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管疾病的发生。因此，主动脉内皮细胞已成为研究心血管疾病发病机制及治疗药物不可缺少的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁(单层鳞状上皮)的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至最小的微血管。

产品信息：

方法简介：实验室分离的人主动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人主动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：人主动脉内皮细胞

组织来源：主动脉组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶人主动脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞分离：

组织取材

无菌操作是底线：取材前对动物/组织进行严格消毒，全程在超净台内操作，所有工具提前灭菌

新鲜度决定活性：取材后立即放入预冷的含双抗的PBS中，30分钟内完成分离，若无法即时处理，可暂存于4℃冰箱（不超过24小时）

精准取材：避开血管、脂肪、结缔组织等非目标组织，比如分离肝细胞时要剔除胆囊，分离神经细胞时要去除脑膜

组织处理

机械法：通过剪碎、研磨、过滤等方式分散组织，适用于结缔组织较少的组织（如肝脏、肾脏），注意力度适中，避免过度研磨损伤细胞

酶解法：根据组织类型选择合适的酶：

胰蛋白酶：适用于消化上皮组织、肝、肾等，浓度0.25%-0.5%，消化时间15-30分钟，37℃

胶原酶：适用于消化结缔组织、脂肪组织、肌肉组织等，浓度0.1%-0.3%，消化时间1-4小时，37℃，可加入EDTA增强效果

透明质酸酶：常与胶原酶联用，消化软骨、滑膜等富含透明质酸的组织

联合法：机械剪碎后再进行酶解，兼顾效率与细胞活性

细胞筛选与纯化

过滤：使用200-400目细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织块

离心：800-1200RPM离心5-8分钟，弃上清后用PBS重洗2-3次，去除细胞碎片和酶液

特异性纯化：使用差速贴壁法（利用不同细胞贴壁速度差异）、密度梯度离心法（如Percoll、Ficoll）、免疫磁珠分选或流式细胞术，获得高纯度目标细胞
实验后处理：

废弃样本处理：

细胞废弃物消毒：实验后的培养基、细胞悬液需用含有效氯的消毒液处理30分钟后再排放，培养瓶、吸管等耗材需高压灭菌后丢弃。

动物组织处理：剩余的动物组织需放入专用的生物危害垃圾袋，由专业机构进行无害化处理，避免生物污染。

实验设备清洁：

超净工作台清洁：实验结束后用75%酒精擦拭台面，打开紫外灯照射30分钟，关闭风机。

培养箱定期清洁：每周用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板，每2周更换一次培养箱内的水盘，避免滋生细菌。

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