小鼠骨髓间充质干细胞
产品信息:
产品名称 小鼠骨髓间充质干细胞
组织来源 骨髓
种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 货号 | P-X1909 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的小鼠骨髓间充质干细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠骨髓间充质干细胞经CD29或CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:小鼠骨髓间充质干细胞
英文简称:BMSCs,MSCs
组织来源:骨髓
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠骨髓间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质系统内存在的骨髓间充质干细胞是一种除造血干细胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中的种子细胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核细胞总数的0.001%-0.1%,含量极低。骨髓间充质干细胞的体外培养条件要求较高,在培养过程中,受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。
原代细胞传代:
传代时机判断
细胞汇合度达到80%-90%时进行传代,避免细胞过度汇合导致接触抑制,影响增殖能力
观察细胞状态:细胞形态正常,无明显漂浮、污染迹象
消化环节控制
消化前准备:吸出旧培养基,用PBS轻轻冲洗细胞1-2次,去除血清(血清会抑制胰蛋白酶活性)
消化液选择:同原代分离,根据细胞类型选择合适的消化酶,胰蛋白酶消化时间一般为1-5分钟,胶原酶消化时间为10-30分钟
消化终止:显微镜下观察到细胞回缩变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化,血清浓度不低于10%
细胞吹打:用移液器轻轻吹打细胞,避免过度用力导致细胞破裂,吹打次数一般为10-15次
传代比例控制
传代比例根据细胞生长速度调整:生长速度快的细胞(如成纤维细胞)可按1:3-1:6传代,生长速度慢的细胞(如内皮细胞、神经细胞)按1:2传代
首次传代比例可适当提高(如1:2),待细胞适应体外培养环境后再调整为常规比例
传代后培养
接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布,放入培养箱中培养
24小时内不要晃动培养瓶,避免细胞贴壁不牢
培养24-48小时后观察细胞贴壁情况,更换新鲜培养基,去除未贴壁的死细胞和细胞碎片
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细胞分离与接种:
酶消化的“度”:酶液浓度和消化时间需精准控制,如胰蛋白酶浓度通常为0.25%,消化时间5-15分钟(根据组织类型调整),消化期间每隔3-5分钟轻轻晃动容器,镜下观察到细胞变圆、间隙增大时,立即加入含血清的培养基终止消化。
吹打力度适中:用巴氏吸管吹打细胞悬液时,避免用力过猛产生大量气泡,以吹打后细胞悬液呈均匀雾状为宜,一般吹打10-15次即可,过度吹打会导致细胞膜破裂。
接种密度适配:根据细胞增殖速度调整接种密度,增殖快的细胞(如成纤维细胞)可适当降低密度,增殖慢的细胞(如神经元)需提高接种密度,确保细胞能相互支持生长。
关键字: 小鼠骨髓间充质干细胞;成纤维细胞样; 贴壁;
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