小鼠脾淋巴细胞

小鼠脾淋巴细胞

产品信息：

产品名称 小鼠脾淋巴细胞

组织来源 脾脏
种属 小鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

培养信息：

方法简介：实验室分离的小鼠脾淋巴细胞采用机械研磨法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的小鼠脾淋巴细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：小鼠脾淋巴细胞

英文简称：SPL

组织来源：脾脏

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：悬浮

细胞形态：圆形

传代特性：不增殖；不传代

消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠脾淋巴细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：

小鼠脾淋巴细胞分离自脾脏组织；脾脏是机体最大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25%，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处，与9－11肋相对，长轴与第10肋一致。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻，前方有胃，后方与左肾、左肾上腺毗邻，下端与结肠脾沟相邻，地柔软的网状内皮细胞器官。淋巴细胞(lymphocyte)白细胞的一种，由淋巴器官产生，机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴器官根据其发生和功能的差异，可分为中枢淋巴器官(又名初级淋巴器官)和周围淋巴器官(又名次级淋巴器官)两类。前者包括胸腺、腔上囊或其相当器官(有人认为在哺乳动物是骨髓)。它们无须抗原刺激即可不断增殖淋巴细胞，成熟后将其转送至周围淋巴器官。后者包括脾、淋巴结等。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖，继而发挥其免疫功能。
原代细胞分离：

组织样本处理：取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中，避免样本干燥和温度变化；修剪时去除坏死、结缔组织等杂质，尽量减小组织块体积以提高消化效率。

消化方法选择：

酶消化法：根据组织类型选对应酶（如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织），严格控制消化温度（通常37℃）和时间，每隔5-10分钟镜下观察，避免过度消化损伤细胞。

机械分离法：适合柔软组织（如脑、肝脏），通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞，操作时动作轻柔，减少细胞机械损伤。

细胞过滤与离心：用合适孔径的细胞筛（如100-200目）过滤细胞悬液，去除未消化的组织块；离心转速通常为1000-1500rpm，时间5-10分钟，避免高速离心导致细胞破裂。
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细胞消化与传代：

方法一：利多卡因消化法

吸出培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞1次

添加1ml 12mM利多卡因消化液，轻轻转动培养瓶使液体覆盖瓶底，37℃温浴3-5分钟

显微镜下观察到细胞回缩变圆后，加入5ml完全培养基稀释消化液

轻轻吹打混匀细胞，1200rpm离心5分钟，弃上清后用完全培养基重悬接种

方法二：胰酶消化法

若利多卡因消化效果不佳，可更换为0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重复上述操作，消化时间控制在1-2分钟

方法三：细胞刮取法

若细胞仍无法消化，加入3ml完全培养基终止消化，用无菌细胞刮轻轻刮取细胞（此方法易造成细胞机械损伤，不推荐）