重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
重组人Granzyme K (GZMK) 是一种在NK细胞和细胞毒性T细胞中表达的丝氨酸蛋白酶,具有胰蛋白酶样活性,可通过切割特定底物诱导靶细胞凋亡,并被最新研究发现可独立激活补体级联反应,驱动炎症和组织损伤。
产品名 | Recombinant Human Granzyme K | 分子量 | 26.1 kDa |
表达区间 | 27-264 | 货号 | XG-DB2149 |
别名
Fragmentin 3, Fragmentin-3, Fragmentin3, GRAK_HUMAN, Granzyme 3, Granzyme K, granzyme K (granzyme 3; tryptase II), granzyme K (serine protease, granzyme 3; tryptase II), Granzyme K precursor, Granzyme-3, Granzyme3, GranzymeK, GZMK, NK TRYP 2, NK TRYP2, NK tryptase 2, NK-TRYP-2, NK-tryptase-2, NKTRYP2, Serine protease granzyme 3, TRYP 2, TRYP2, Tryptase II, TryptaseII
宿主; E.Coli
表达区间; 27-264
分子量; 26.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
突触相关蛋白SNAP47 | 组织β-内酰胺酶报告基因活性荧光定量酶联免疫试剂盒 |
DNAJC2蛋白 | 细胞IGF 蛋白表达比色法定量酶联免疫试剂盒 |
动物源性食品猪源基因pcr检测试剂盒 | 载玻片细胞PARP蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
正常女性人体肝组织微粒体组分(5毫克/毫升) | TrpE融合蛋白扩增试剂盒 |
组织磷酸二酯酶4(PDE4)活性荧光定量pcr检测试剂盒 | 脑胶质瘤发病相关蛋白2抗体 |
富含亮氨酸胶质瘤失活蛋白1 | 垂体同源盒蛋白1抗体 |
细胞内氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子) | 组织硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
饮料阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞葡萄糖激酶(glucose kinase)比色法定量pcr检测试剂盒 |
中胚层诱导早期反应蛋白3 | 血管内皮生长因子受体2抗体 |
钾离子通道蛋白13 | APC标记人CD69单克隆抗体 |
p21活化蛋白激酶ARHG7 | 卡尔曼综合症基因1抗体 |
膜相关蛋白酪氨酸激酶LYN单克隆 | Recombinant Human Granzyme KSWI/SNF相关基质关联肌动蛋白依赖染色质调控因子亚家族D2抗体 |
细菌活力蓝色荧光(DAPI)检测试剂盒 | G蛋白偶联受体17抗体 |
关键字: Granzyme K;26.1 kDa; 27-264;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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