重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human HtrA3 (High-temperature requirement factor A3) 是一种在大肠杆菌(E. coli)中表达的、通常带有 His 标签的人源重组丝氨酸蛋白酶。该蛋白纯度超过 95%,以冻干粉形式提供,主要用于研究其在蛋白质质量控制、细胞凋亡、线粒体稳态及细胞外基质(ECM)降解中的分子机制。HtrA3 在心脏中高表达,其功能涉及调控血管生成(通过降解 IV 型胶原促进尖端细胞形成)、心肌纤维化及肿瘤进展,是心血管疾病和癌症研究的重要靶点。
产品名 | Recombinant Human HtrA3 | 分子量 | 24.3 kDa |
表达区间 | 132-353 | 货号 | XG-DB2296 |
别名
High temperature requirement factor A3, High-temperature requirement factor A3, HtrA serine peptidase 3, HTRA3, HTRA3_HUMAN, Pregnancy related serine protease, Pregnancy-related serine protease, Probable serine protease HTRA3, PRSP, Serine protease HTRA3, Tasp
宿主; E.Coli
表达区间; 132-353
分子量; 24.3 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
丝氨酸蛋白酶抑制剂A10 | 植物磷酸葡萄糖酸脱氢酶(phosphogluconate dehydrogenase;PGD)电泳分析试剂盒 |
跨膜蛋白59 | 人体TNF-βRFLP基因分析试剂盒 |
半胱-3(CASPASE-3) | 石蜡切片组织HISTONE H3蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞磷酸二酯酶2(PDE2)活性酶连续循环光谱法定量pcr检测试剂盒 | 人血液补体蛋白C3免疫比浊法定量酶联免疫试剂盒 |
食物抗坏血酸比色法定量pcr检测试剂盒 | SUSD5蛋白抗体 |
高尔基体卷曲螺旋蛋白1 | G蛋白偶联受体116抗体 |
细胞FSH-BETA蛋白表达荧光定量pcr检测试剂盒 | 细胞基质金属(MMP-2)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
细胞糖胺多糖(GAG)总含量阿尔新蓝(alcian blue)比色法定量pcr检测试剂盒 | 动物脂肪组织细胞分离培养试剂盒 |
组织蛋白酶K | Duffy血型趋化因子受体抗体 |
角蛋白相关蛋白KAP3.3 | 鸟嘌呤核苷酸交换因子4 |
p53结合蛋白3 | 二肽基肽酶9抗体 |
植物叶片活性叶绿体分离试剂盒 | Recombinant Human HtrA3胰高血糖素抗体 |
胚胎干细胞关键蛋白1单克隆抗体 | AN1型锌指蛋白5抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: HtrA3;24.3 kDa; 132-353;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。