操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human IRSp53 (Insulin Receptor Substrate p53) 是一种在大肠杆菌(E. coli)中表达的、带有 His 标签的人源重组蛋白,通常以无菌液体或冻干粉形式提供,纯度超过 95%。该蛋白是胰岛素受体底物家族的成员,作为一种关键的适配蛋白,含有 IRAK、PH 和 SH3 等结构域,主要介导细胞膜受体(如胰岛素受体和表皮生长因子受体 EGFR)与下游信号通路之间的相互作用。IRSp53 在调控细胞形态发生、细胞迁移、细胞骨架重排以及细胞增殖中发
产品名称; Recombinant Human IRSp53
别名; BAI-associated protein 2, BAI1 associated protein 2, BAI1-associated protein 2, BAIAP 2, Baiap2, BAIP2_HUMAN, BAP2, Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2, Fas ligand-associated factor 3, FLAF3, Insulin receptor substrate p53, Insulin receptor substrate p53/p58, Insulin receptor substrate protein of 53 kDa, IRS-58, IRSp53, IRSp53/58, Protein BAP2
宿主; E.Coli
表达区间; 1-522
分子量; 57.3 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

髓鞘转录因子1 | 脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)活性荧光定量酶联免疫试剂盒 |
磷酸化成视网膜细胞瘤抑癌蛋白 | 人体血液正铁白蛋白(methemalbumin)含量比色法定量酶联免疫试剂盒 |
非同位素化学发光法RNA北方杂交试剂盒 | 植物铜ATP酶(Cu++ -ATPase)活性比色法量酶联免疫试剂盒 |
细胞RSK3激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 人胰岛素标准溶液 |
吸烟者人体肺组织S9组分(5毫克/毫升) | TRIT1蛋白抗体 |
果胶酶 | LIN37蛋白抗体 |
细胞线粒体复合物IV蛋白表达流式细胞仪pcr检测试剂盒 | 通用型血液对氧磷酶1(PON1)有机磷酸酶活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
细胞O链接硫酸酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量阿尔新蓝(alcian blue)比色法定量pcr检测试剂盒 | PICOGREEN细胞繁殖定量pcr检测试剂盒 |
周期素B1 | FITC标记人CD18单克隆抗体 |
肌动蛋白C1 | 磷脂酰肌醇激酶催化亚单位D抗体 |
ras基因相关蛋白RAB7样蛋白1 | 二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶2抗体 |
大量真菌/酵母细胞基因组DNA纯化试剂盒 | Recombinant Human IRSp53血清淀粉样蛋白SAA2抗体 |
生物素标记的人血管内皮生长因子单克隆抗体 | 5号染色体开放阅读框60抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: IRSp53;57.3 kDa;1-522;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。