鱼源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

产品介绍：

检测原理与目的

检测原理：基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，采用TaqMan荧光探针法。试剂盒中含有针对鱼类基因组高度保守且特异的基因区域（通常为线粒体12S rRNA基因或细胞色素b基因）设计的引物和探针。

在PCR扩增过程中，随着目标DNA片段的指数级扩增，探针被Taq酶切降解，释放出荧光信号（通常为FAM通道）。

仪器实时监测荧光信号的累积，并根据Ct值（循环阈值）进行定性或定量分析。

核心目的：

物种鉴别：准确鉴定肉制品、水产品、加工食品中是否含有鱼类成分，防止掺假或虚假标注（如用廉价鱼冒充高价鱼）。

过敏原检测：根据食品安全法规，检测食品中是否含有鱼类过敏原成分，保障过敏人群的健康安全。

饲料安全：检测饲料中是否非法添加鱼粉或鱼源性成分。

�� 产品核心参数与组成

项目  详细信息

检测方法  实时荧光定量 PCR (TaqMan 探针法)

检测靶标  鱼源性特异性核酸片段 (如线粒体 12S rRNA 基因)

产品规格  48T 或 50T (即 48/50 次测试)

检测限  最低检测限可达 0.1% (部分产品检出限可达 500 copies/μL 以下)

主要组分  qPCR反应液 (含dNTPs、缓冲液)、酶混合液 (Taq酶)、引物探针混合液、阳性对照 (鱼基因组DNA)、阴性对照 (无菌水)

操作流程

样本处理：提取待测样本（如鱼肉糜、饲料、化妆品等）的基因组DNA。

试剂准备：在冰上将qPCR反应液、酶混合液和引物探针混合液按说明书比例混合，配制成预混液。

加样：将配制好的预混液分装到PCR管/板中，然后加入DNA模板，同时设置阳性和阴性对照。

qPCR扩增：将反应体系放入荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96等）中，运行两步法程序：

预变性：95℃ 10 min

扩增循环：95℃ 15 sec → 60℃ 1 min (采集荧光)，40-45 个循环。

结果分析：仪器自动根据荧光信号和Ct值判断结果。

�� 结果判读标准

结果类型  判读标准  解释

阳性 (+)  扩增曲线呈典型的“S”型，且 Ct 值 ≤ 35-40。  样品中检测到鱼源性成分，判定为阳性。

阴性 (-)  无 Ct 值，或 Ct 值 ≥ 阈值，曲线为直线或无指数增长期。  样品中未检测到鱼源性成分，判定为阴性。

无效  阳性对照未扩增 (Ct值无或>阈值)，或阴性对照出现扩增。  实验失败（可能存在试剂失效或污染），结果无效，需重做。

�� 标准化与权威性

该检测方法通常参照SN/T 1961.14-2013《出口食品过敏原成分检测 第14部分：实时荧光PCR方法检测鱼成分》进行。该标准规定了出口食品中鱼过敏原的检测流程和判定标准，确保了检测结果的权威性和合规性。

⚠️ 注意事项

防止污染：qPCR灵敏度极高，极易受气溶胶污染影响。建议严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），并使用带滤芯的枪头。

避光保存：反应液中的荧光探针成分对光敏感，试剂应 -20℃ 避光 保存，使用前避免长时间暴露在强光下。

内源基因对照：为了确保检测结果的准确性（排除假阴性），建议同时使用鱼内源基因检测试剂盒进行检测，以确认样本DNA提取成功且无PCR抑制物。

适用范围：主要用于食品安全检测、饲料成分监控和科研实验，通常仅供科研使用。

公司正在出售的产品：

高特异性

引物设计基于目标基因保守区域，可区分高度同源序列（如病毒变异株）。

高灵敏度

检测限低至10拷贝/反应，适用于微量样本。

高效扩增

热启动酶（如HotStarTaq）减少非特异性扩增，30分钟内完成40个循环。

防污染设计

UNG酶系统降解残留产物，避免交叉污染。

稳定性提升

冻干预混技术实现常温运输，操作便捷。