产品介绍:

该试剂盒主要用于非洲猪瘟病毒的快速检测,特别适用于不具备复杂PCR实验室条件的猪场、屠宰场或边境检疫等场景。
与传统的荧光定量PCR法不同,恒温荧光法(通常基于LAMP或RPA原理)无需复杂的热循环设备,具有操作简便、速度快的特点。
产品名称 | 非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 48T |
货号 | AP3585 |
�� 产品核心信息

检测对象:非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus, ASFV)。
检测原理:恒温荧光扩增技术(通常为环介导恒温扩增法 LAMP 或 重组酶聚合酶扩增法 RPA)。该技术利用多组特异性引物识别靶序列上的多个位点,在恒定温度(通常为60-65℃)下进行核酸扩增,并通过荧光染料(如SYTO-9或特异性探针)实时监测扩增过程。
灵敏度与特异性:
高灵敏度:最低检测限通常可达 1×10³ copies/mL(部分产品可达100拷贝/mL)。
高特异性:特异性≥99%,不会与其他猪源病原(如猪瘟病毒、圆环病毒等)发生交叉反应。
适用样本:抗凝全血、血清、脾脏、淋巴结、扁桃体组织匀浆液等。
适用仪器:恒温荧光检测仪(如YR-820等专用设备)或具有恒温扩增功能的荧光定量PCR仪。
�� 产品组成与规格

组分名称 规格示例 说明
反应液A (Reagent A) 1100 μL (管) 含引物混合物、缓冲液等核心成分。
反应液B (Enzyme B) 50 μL (管) 含Bst DNA聚合酶或其他恒温扩增酶,需-20℃保存。
阳性对照 (Positive Control) 100 μL (管) 含ASFV目标基因片段的质粒或灭活病毒DNA。
阴性对照 (Negative Control) 100 μL (管) 无菌双蒸水或缓冲液。
C-I (荧光增强液) 1000 μL (管) 部分产品包含,用于增强荧光信号。
�� 操作流程简述

样本采集与处理:
血液样本:采集抗凝血(EDTA抗凝)或血清。
组织样本:取脾脏、淋巴结或扁桃体,加入生理盐水研磨制成10%匀浆,离心取上清。
DNA提取:
使用商用病毒DNA提取试剂盒或试剂盒推荐的简易裂解法提取样本中的总DNA。
关键点:DNA纯度直接影响扩增效率,需避免抑制物残留。
试剂准备与加样:
将反应液和酶液在冰上解冻并充分混匀,离心30秒。
按说明书比例配制反应体系(通常为25-50 μL),向反应管中加入提取的DNA模板(通常2-5 μL)。
必须设置:阴性对照(无菌水)和阳性对照(试剂盒提供)。
恒温扩增:
将反应管放入恒温荧光检测仪中。
推荐程序:
反应温度:63℃(具体以说明书为准);
反应时间:30-60分钟。
结果判读:
阳性(+):反应管内出现典型的“S”型扩增曲线,且仪器自动判定为阳性。
阴性(-):无扩增曲线,或仪器判定为阴性。
质控要求:阳性对照应出现明显的扩增曲线,阴性对照应无扩增曲线。
⚠️ 注意事项与安全提示

严格分区操作:为防止气溶胶污染导致假阳性,实验必须严格分区(试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区),且各区物品专用。
试剂保存:试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存。酶混合物对温度敏感,应避免反复冻融。
仪器适配:恒温荧光法对仪器的温度均一性要求较高,建议使用试剂盒指定或推荐的恒温荧光检测仪。
临床意义:非洲猪瘟致死率极高,且目前无有效疫苗。早期快速检测有助于及时封锁疫点、扑杀病猪,防止疫情扩散。
废弃物处理:反应结束后,严禁开盖,以免扩增产物(含荧光染料和DNA)污染环境。应将反应管密封后作为生物废弃物处理。
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PCR试剂盒的本质与用途:

PCR(聚合酶链式反应)是一种基因扩增技术,
用于检测或定量特定DNA/RNA序列。其核心是通过温度循环(变性、退火、延伸)扩增目标基因片段,而非培养生物体。
关键点:
无需培养:PCR直接检测样本中的核酸,无需预先培养微生物或细胞。
应用场景:病原体检测(如病毒、细菌)、基因表达分析、遗传病诊断等。
关键字: 非洲猪瘟病毒 ;ASFV ; 恒温荧光法;核酸检测试剂盒;
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